Avaliacao da rapida supressao da secrecao in vivo do hormonio de crescimento de camundongos por queratinocitos humanos primarios transduzidos.

• Processo: 05/00676-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Cibele Nunes Peroni
• Beneficiário: Renata Damiani
• Instituição Sede: Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Terapia genética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Secrecao In Vivo | Terapia Genica | Vetor Retroviral | Terapia gênica

Resumo

Nosso grupo de pesquisa vem trabalhando no desenvolvimento de uma estratégia de terapia gênica cutânea para tratamento da deficiência de GH, utilizando um modelo animal. De acordo com essa estratégia, queratinócitos humanos primários foram transduzidos com o vetor retroviral pLXSN contendo o gene do hormônio de crescimento de camundongo (mGH) e já foram obtidos altos níveis de expressão in vitro, que alcançaram até 11 microgramas mGH/milhão de células/dia. O epitélio formado por estas células modificadas geneticamente apresentou porém uma queda da ordem de 80 % da secreção, quando os queratinócitos foram destacados da placa de cultura para serem implantados em camundongos anões imunodeficientes (lit/scid). Este problema foi solucionado com a construção de uma cultura organotípica e alteração do procedimento cirúrgico. Os níveis circulantes de mGH em camundongos implantados alcançaram um valor máximo de 21 ng mGH/ml após 1 h do implante, mas se igualaram aos valores basais (~2 ng/ml) após 24 h. O principal objetivo do trabalho proposto é portanto isolar e avaliar alguns dos fatores envolvidos na falta de durabilidade da secreção do transgene in vivo, que ainda constitui um dos maiores impedimentos para o sucesso deste tipo de terapia.