Estudo dos eventos relacionados à ativação imediata da via dectina-1 em deficiência de AIRE

• Processo: 09/51747-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Antonio Condino Neto
• Beneficiário: Luis Alberto Pedroza
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Candidíase Fagócitos Imunidade inata
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aire | Candidiase | Dectina-A | Fagocitos | Imunidade Inata | Nf-Kb

Resumo

A Poliendocrinopatia Autoimune Associada à Candidíase e Distrofia Ectodérmica é uma síndrome caracterizada pela presença de autoanticorpos específicos para diversos antígenos naturalmente existentes no corpo humano, o que leva a doenças autoimunes além de uma elevada suscetibilidade a infecções crônicas e recorrentes por Cândida albicans. Embora a doença autoimmune possa ser explicada por defeitos no timo, a suscetibilidade a candidíase ainda permanece obscura. Recentemente nosso grupo demonstrou que a Proteína AIRE é importante para a via de sinalização da Dectina-1, crítica para a resposta a C, albicans, sendo que a ausência de AIRE leva a ativação defeituosa do fator transcricional NF-kB. Também demonstramos que AIRE interage com as principais moléculas que compõem a via de sinalização da Dectina-1. No presente trabalho, propor mos avaliar como a ausência da proteína AIRE influencia eventos específicos e importantes relacionados ao estímulo da via Dectina-1, especificamente a fosforilação de proteínas, formação do complexo CARD9/BCL10/MALT1 e a degradação do Ik-B alfa. Para isso faremos os seguintes estudos: 1- Transfectar células THP-1 tornando-as deficientes em AIRE usando a técnica de shRNA ; 2-Avaliar a fosforilação de Syk e CARD9 por meio de imunoprecipitação e WB; 3- Avaliar a formação do complexo CARD9/BCL10/MALT1 por meio de imunoprecipitação e WB ; 4- Avaliar a degradação do Ik-B alfa por meio de WB. As células transfectadas na etapa 1 serão estimuladas nas etapas 2 e 4 com Curdlan, um agonista especifico para Dectina-1. Tais estudos pretendem contribuir para o avanço do conhecimento sobre os eventos relacionados à ativação via Dectina-1, os possíveis mecanismos moleculares pelos quais a proteína AIRE interage com esta via, e finalmente melhor compreender a resposta imune inata a C. albicans. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PEDROZA, LUIS A.; KUMAR, VIPUL; SANBORN, KERI B.; MACE, EMILY M.; NIINIKOSKI, HARRI; NADEAU, KARI; VASCONCELOS, DEWTON DE MORAES; PEREZ, ELENA; JYONOUCHI, SOMA; JYONOUCHI, HARUMI; et al. Autoimmune regulator (AIRE) contributes to Dectin-1-induced TNF-alpha production and complexes with caspase recruitment domain-containing protein 9 (CARD9), spleen tyrosine kinase (Syk), and Dectin-1. Journal of Allergy and Clinical Immunology, v. 129, n. 2, p. 464-U287, FEB 2012. (09/51747-3, 99/07399-7)

KUMAR, VIPUL; PEDROZA, LUIS A.; MACE, EMILY M.; SEEHOLZER, STEVEN; COTSARELIS, GEORGE; CONDINO-NETO, ANTONIO; PAYNE, AIMEE S.; ORANGE, JORDAN S.. The Autoimmune Regulator (AIRE), Which Is Defective in Autoimmune Polyendocrinopathy-Candidiasis-Ectodermal Dystrophy Patients, Is Expressed in Human Epidermal and Follicular Keratinocytes and Associates With the Intermediate Filament Protein Cytokeratin 17. American Journal of Pathology, v. 178, n. 3, p. 983-988, MAR 2011. (09/51747-3)