Expressão e purificação das proteínas do exossomo de Saccharomyces cerevisiae

• Processo: 06/56837-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2006
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Juliana Silva da Luz
• Beneficiário: Márcia Cristina Teixeira dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Interação proteína-proteína Processamento de RNA Expressão de proteínas Purificação de proteínas Saccharomyces cerevisiae Exossomos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Exossomo | Interacao Proteina-Proteina | Interacao Proteina-Rna | Processamento De Rrna

Resumo

Em eucariotos, o exossomo é um complexo de exoribonucleases 3'-5' que participa do processamento e da degradação de vários tipos de RNA. O exossomo S. cerevisiae é constituído por 11 subunidades. Esse complexo está presente tanto no núcleo quanto no citoplasma, sendo que as duas formas diferem apenas pela presença de uma subunidade, Rrp6p que aparece no complexo nuclear. As demais proteínas são comuns às duas formas, sendo que quatro destas tiveram sua atividade de exoribonuclease 3-5' demonstrada in vitro: Rrp4p, Rrp6p, Rrp41p e Rrp44p. Seis das subunidades do exossomo apresentam homologia de seqüência a RNase PH (Rrp41p, Rrp42p, Rrp43p, Rrp45p, Rrp46p, Mtr3p), enquanto que Rrp44p apresenta homologia a RNase R, Rrp6p a RNase D, e Rrp40p e Csl4p à Rrp4p. Este projeto visa a expressão e purificação de proteínas componentes do exossomo de levedura, que ainda não tiveram a atividade de RNase descrita, para testes bioquímicos "in vitro". (AU)