Estudo do envolvimento da metalo-peptidase PHEX em processos fisiológicos e fisiopatológicos

• Processo: 07/57471-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Adriana Karaoglanovic Carmona
• Beneficiário: Nilana Meza Tenório de Barros Jaggi
• Instituição Sede: Departamento de Biofísica. Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/09994-7 - Substratos e inibidores peptídicos para enzimas proteolíticas, AP.PRNX.TEM
• Assunto(s): Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Expressao | Inibidores | Metalo-Peptidase | Phex | Substratos | Tumor

Resumo

A XLH (hipofosfatemia ligada ao cromossomo X) é a forma mais prevalente (1:20.000) de raquitismo hereditário em humanos, caracterizada por defeitos na reabsorção de fosfato, mineralização óssea, metabolismo da vitamina D, retardo no crescimento e osteomalácia. Em 1995, um consórcio internacional de pesquisa sobre XLH (The Hyp Consorptium) mapeou a região Xp22.1 do cromossomo X, clonou e identificou o gene PHEX como sendo o gene mutado e responsável pela anomalia. No entanto, até o momento ainda não foi elucidado a real função e substrato fisiológico para esta metalo-peptidase. Nossos dados têm mostrado uma elevada expressão da peptidase PHEX em células tumorais. Diante disso, propomos a investigação da expressão e localização da PHEX nas células de carcinoma epinocelular, tumor primário e metástase comparativamente, e a inibição da expressão de PHEX no tumor primário de SCC por RNAi com posterior análise da capacidade de proliferação tumoral in vitro e in vivo. A PHEX tem sido associada à elaboração, deposição e/ou mineralização em osteoblastos (Ruchon et al., 1998). Dados preliminares têm indicado um possível direcionamento da PHEX para a matriz extracelular durante a mineralização. Para investigar este fato, propomos então um estudo detalhado da localização da PHEX durante o processo de mineralização de osteoblastos e diferenciação a osteócitos. Além destas propostas, temos ainda como objetivo clonar e expressar a PHEX. A peptidase expressa será então utilizada para o seleção de inibidores e substratos previamente desenvolvidos, bem como, na produção de anticorpos policlonais. A obtenção dos resultados propostos neste projeto poderão contribuir efetivamente na elucidação da incógnita PHEX. (AU)