Microambientes redox e sua implicacao na exocitose em celulas beta pancreaticas.

• Processo: 10/50041-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Angelo Rafael Carpinelli
• Beneficiário: Eduardo Rebelato Lopes de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 12/08739-2 - Microambientes redox e sua implicação na exocitose em células beta pancreáticas, BE.EP.PD
• Assunto(s): Exocitose
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Exocitose | Glutarredoxina | Microambientes Redox | Nad P H Oxidase

Resumo

O mecanismo de extrusão dos grânulos que contêm insulina é um processo dependente do influxo de Ca2+ pela membrana plasmática. Esse processo ocorre através da ativação dos canais para cálcio sensíveis à voltagem presentes em domínios na membrana plasmática, denominados lipid rafts, e possivelmente co-localizados em clusters com o local de extrusão dos grânulos insulínicos. Essa co-localização direciona a formação de um micro domínio intracelular de Ca2+ para a ativação da maquinaria exocitótica. Em células endoteliais, a enzima produtora de espécies reativas de oxigênio (EROs), a NAD(P)H oxidase, também se localiza em lipid rafts. Adicionalmente, enzimas antioxidante como a glutarredoxina (GRx), encontran-se presentes em locais distintos no interior celular, sendo a GRx altamente expressa em grânulos insulínicos, e mediando o efeito estimulatório do NADPH sobre a medida de capacitância de membrana, frente a trens de despolarização. Sob estes aspectos, associando a curta meia vida e à pequena distância de difusão das EROs, suscita-se a hipótese de uma ação local de sinalização redox, atuando como microambientes distintamente controlados. Dessa forma, a NAD(P)H oxidase e enzimas antioxidantes como a GRx, parecem favorecer uma regulação redox específica e a formação de microambientes redox próximos ao micro domínios de secreção, possivelmente pela proximidade de localização desses componentes. Assim, pretendemos verificar a presença de microambientes redox nas células beta pancreáticas e a proximidade destes com os locais de extrusão dos grânulos insulínicos. Além disso, analisaremos a possível participação das enzimas NAD(P)H oxidase e GRx através da combinação das técnicas de RNA de interferência, de microscopia de campo evanescente e eletrofisiológicas, analisando o efeito da modulação redox sobre o processo de excitose dos grânulos insulínicos. (AU)