Regulacao e caracterizacao de um possivel gene antioxidante homologo a tioredoxina peroxidase (tpx1).

• Processo: 99/05739-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 1999
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Gisele Monteiro
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09710-0 - Oxidação de proteínas e atividade antioxidante da enzima 'Thiol Specific Antioxidant' (TSA), AP.JP
• Assunto(s): Antioxidantes Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antioxidante | Expressao Genica | Peoxidos | Tiol

Resumo

Tioredoxina peroxidase (Tpxl) é uma enzima antioxidante de Saccharomyces cerevisae que decompõe peróxidos às custas de grupos sulfidrilas. Nesta levedura existem dois genes que apresentam alta homologia ao gene de Tpxl. Obtivemos junto à comunidade Européia uma linhagem de levedura deficiente em um desses genes (YBL064C), bem como o gene clonado em E. coli. Pretendemos estudar a regulação de YBL064C por Northern blotting e por ensaios de gene repórter (beta-galactosidase), bem como identificar fatores de transcrição. Analisaremos a sensibilidade da linhagem deficiente em YBL064C a peróxidos. Para determinar se YBL064C possui atividade antioxidante, pretendemos inserir o referido gene em um vetor de expressão para obter mais facilmente a proteína pura. Dessa forma, será possível obter o anticorpo anti-YBL064C, com o qual pretendemos identificar o compartimento celular dessa proteína e realizar estudos de expressão a nível pós-transcripcional. (AU)