Estrategias moleculares para expressao da lectina recombinante km+ (artocarpina) ativa e livre de lipossacarideos (lps)

• Processo: 07/52498-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2007
• Data de Término da vigência: 04 de setembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Helena de Souza Goldman
• Beneficiário: Maria Cristina da Silva Pranchevicius
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Lectinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Km+(Artorcarpina) | Lectinas | Lipopolissacarideos (Lps)

Resumo

KM+ (artocarpina) é uma lectina que possui a capacidade de estimular a migração de neutrófilos, por haptotaxia (Ganiko et al., 2005); ativar mastócitos provocando sua desgranulação e liberação de mediadores (Moreno, 2003). Seu efeito modulador de citosinas (Th2 para Th1) atua na indução de respostas protetoras contra infecções causadas por Leishmania major (Panunto-Castelo et al., 2001), Leishmania amazoensis (Teixeira et al., 2006), Paracoccidioides brasiliensis (Coltri et al, manuscrito em preparação) e Listeria monocytogenes (Conrado et al, manuscrito em preparação). KM+ induz eficiente regeneração tecidual, como de superfície cutânea, lesada por queimadura, e córnea, lesada por abrasão, portanto, representa uma alternativa terapêutica para o tratamento dessas lesões (patente n° WO20041008). Estamos propondo a obtenção de um sistema heterólogo de expressão de rKM+, livre de LPS, que permitirá a manutenção de suas propriedades biológicas aplicáveis aos interesses biotecnológicos, farmacêuticos e terapêuticos. As estratégias que utilizaremos serão: expressões secretórias da proteína recombinante KM+ para o periplasma e meio de cultura em linhagem E. coli Códon Plus (RP), produção de uma linhagem E. coli Codon Plus (RP), mutante para lipídeo A, expressão em bactérias B. subtilis e B. megaterium, em levedura P. pastoris, ou tentaremos otimizar a expressão de KM+ em plantas transgênicas. (AU)