Influencia do polimorfismo g/gg (-1607) na atividade transcricional do gene da mmp-1 em fibroblastos gengivais humanos.

• Processo: 06/06227-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2007
• Data de Término da vigência: 15 de março de 2008
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Sergio Roberto Peres Line
• Beneficiário: Maria Cristina Leme Godoy dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Genética Fator de crescimento transformador beta Metaloproteases RNA mensageiro Polimorfismo genético
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fibroblastos Gengivais | Il-1 | Metaloprotease | Polimorfismo Genetico | Rnam | Tgf-Beta | Genética

Resumo

As metaloproteinases representam a maior classe de enzimas responsável pelo metabolismo da matriz extracelular, contribuindo para degradação e remodelação do colágeno de tecidos injuriados. A atividade das MMPs nos tecidos orais representa a real via efetora da destruição tecidual. A síntese destas enzimas é influenciada por citocinas inflamatórias e fatores de crescimento. O polimorfismo na posição -1607 do gene que transcreve a MMP-1 em humanos está associado a diversas patologias e tem sido relacionado com o aumento da expressão desse gene. O objetivo do estudo será investigar os níveis de expressão do RNAm da MMP-1 em cultura de fibroblastos gengivais humanos contendo diferentes genótipos do polimorfismo -1607 do gene da MMP-1. Além disso, comparar as culturas tratados com IL-1 e TGF-1 para avaliar o potencial individual de resposta a esses importantes fatores relacionados a inflamação. Para tanto, voluntários serão caracterizados de acordo com o genótipo do polimorfismo -1607 da MMP-1 por reação PCR-RFLP através de DNA extraído de células epiteliais da mucosa bucal. Utilizando a técnica de clonagem em vetor plasmideano com o gene da luciferase e transfecção, esse genótipos serão estudados em culturas de fibroblastos gengivais tratados com: DMEM (Grupo 1) ou DMEM com IL-1 (Grupo 2) ou DMEM com TGF-1 (Grupo 3). Atividade da luciferase será medida em luminômetro. O fragmento contendo o polimorfismo -1607 do gene da MMP-1 também será analisado pelo ensaio de “gel shift”. Para confirmação da expressão da MMP-1 nas culturas estudadas, será analisada a presença de RNAm da MMP-1 por RT-PCR.