Clonagem e expressao de crotamina - uma miotoxina do veneno de cascabel (crotalus durissus terrificus).

• Processo: 00/00237-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Tetsuo Yamane
• Beneficiário: Juliana Penteado Rodrigues
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Crotamina Crotalus durissus Venenos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crotalus Durissus | Crotamina | Veneno

Resumo

A crotamina (CR) recombinante tem sido expressada, por nosso grupo, em E.coli, na forma de proteína de fusão (6xHIS- CR). Dado que a toxina possui 3 pontes dissulfeto, é essencial que seja testada a expressão em células eucarióticas. Nesse sentido, a seqüência nucleotídica da CR será ligada em fase de leitura com o promotor forte da gal do shuttle vector pYES (Invitrogen). A construção será então, usada para transformar células de S.cerevisiae. A produção, refolding e atividade biológica da CR recombinante nos dois sistemas de expressão serão comparadas. (AU)