Geracao e analise de um banco representativo de cdnas de bothrops insularis, focalizado a identificacao de novas toxinas e a caracterizacao das sequencias completas de alguns transcritos.

• Processo: 04/10803-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2004
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Inácio de Loiola Meirelles Junqueira de Azevedo
• Beneficiário: Luciana Iwanaga Leao
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Transcriptoma Análise de sequência de DNA Etiquetas de sequências expressas Toxinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bothrops Insulares | Ests | Sequenciamento De Dna | Toxinas | Transcriptoma

Resumo

Nos últimos anos, as abordagens envolvendo a caracterização de transcriptomas de animais peçonhentos provaram ser um meio rápido, eficiente e menos laborioso de se descrever a composição de toxinas nesses animais, pelo menos do ponto de vista da expressão de seus genes. Num trabalho anterior geramos um banco de dados 610 Expressed Sequence Tags (ESTs) da serpente Bothrops insularis, cujo veneno apresenta características próprias por ter se desenvolvido em um ambiente com forte pressão seletiva. Os resultados desse trabalho permitiram o levantamento das principais toxinas presentes em seu veneno e a identificação de novas moléculas nunca antes encontradas e que estão sendo investigadas. No presente projeto, objetivamos a geração de um maior número de ESTs a partir das mesmas bibliotecas para garantir a presença de um maior número de seqüências não tão representativas dentro do transcriptoma da glândula de veneno de B. insularis. Conseqüentemente, faremos uma nova análise do banco de ESTs (incluindo agrupamento (clustering), anotação e as análises qualitativa e estatística das toxinas e proteínas celulares encontradas). Além disso, a fim de tomar o banco melhor aproveitável para identificação de proteínas, as seqüências de maior interesse serão completamente seqüenciadas através da técnica de "primer-walking". Dessa forma, esperamos compor um quadro mais representativo dos transcritos da glândula de veneno de 6, insularis e gerar um banco de cDNAs completos (full-length) de toxinas ofídicas. (AU)