Microarranjos de dna na analise da expressao temporal de genes na infeccao de celula humana por trypanosoma cruzi.

• Processo: 04/07161-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2005
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Bianca Silvana Zingales
• Beneficiário: Aurélio Pedroso Júnior
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Doença de Chagas Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Etiquetas de sequências expressas Trypanosoma cruzi Genômica comparativa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Doenca De Chagas | Ests | Expressao Diferencial De Genes | Genomica Comparativa | Microarranjos De Dna | Trypanosoma Cruzi

Resumo

Este projeto tem como objetivo geral comparar a evolução temporal da expressão gênica de duas cepas de Trypanosoma cruzi durante a infecção de uma linhagem celular humana, bem como caracterizar a resposta da célula hospedeira à infecção pelas duas cepas. Os objetivos específicos são: (a) comparar a expressão gênica de duas cepas de T. cruzi isoladas, respectivamente, de paciente assintomático e de paciente com cardiopatia chagásica durante a infecção de culturas de fibroblastos humanos. Para esta finalidade serão utilizados microarranjos de T. cruzi já disponíveis e em construção em nosso laboratório no IQUSP; (b) comparar a expressão gênica de fibroblastos humanos ao longo da infecção com as duas cepas de T. cruzi, utilizando microarranjos humanos, a serem disponibilizados pelo Dr. David Munroe (NCI-SAIC, Frederick, EUA), no segundo ano do projeto. As sondas que apresentarem hibridização diferencial serão comprovadas por Northern blot e Real Time PCR. Um estudo-piloto já foi realizado, onde foi analisada a expressão gênica de fibroblastos humanos após 24 horas de infecção com T. cruzi, utilizando microarranjos contendo cerca de 24.000 seqüências humanas. Este estudo mostrou que a abordagem experimental é válida, e que um estudo mais abrangente poderá fornecer dados interessantes que podem contribuir para o entendimento da patogênese das cepas de T. cruzi. (AU)