Efeito da angiotensina II e do peptídeo atrial natriurético na regulação do pH intracelular e da concentração de cálcio livre no citosol em células T84 em cultura

• Processo: 00/06807-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Margarida de Mello Aires
• Beneficiário: Raif Musa Aziz
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Angiotensina Ii

Resumo

Trabalho que acaba de ser realizado neste Laboratório (OLIVEIRA-SOUZA & MELLO-AIRES, 2000) em cultura de células MDCK (derivadas de rim de cães) indica que: 1) ANG II (1pM ou 1nM) estimula e ANG II (100 nM) inibe o trocador Na+/H+ (isoforma NHE1); 2) ANG II (1pM - 100 nM) eleva a [Ca++]i de modo dose dependente e 3) ANP (1 uM) não tem ação sobre o trocador mas, impedindo a elevação da [Ca++]i, inibe ambos efeitos da ANG II sobre o trocador. Como a isoforma NHE1 é de destribuição ubiqüa, sendo a responsável pela regulação do pHi, é provável que essa interação hormonal ocorra em todas as células, independentemente do tecido considerado. Entretanto, tal hipótese tem que ser comprovada em células provenientes de outros tecidos. Frente ao exposto, e considerando que a linhagem celular T84 é derivada de um carcinoma colônico humano transplantado subcutaneamente em uma linhagem de rato desprovido de pelagem (BALB/c), o presente projeto visa estudar a interação da ANG II (1 pM, 1 nM e 100nM) com o ANP (1uM) sobre a regulação do pHi e da [Ca++]i em monocamadas de cultura de células T84. As medidas de pHi serão feitas por microscopia de fluorescência, através da sonda intracelular BCECF/AM, após acidificação intracelular por pulso ácido de NH4CI. A [Ca++]i será analisada por microscopia confocal em tempo real, usando a sonda intracelular fluorescente FLUO-4/AM. Também serão avaliadas as vias intracelulares dessa interação hormonal. (AU)