Modificações do proteoma durante a diferenciação de células dendríticas a partir de células CD34+ de sangue de cordão umbilical humano

• Processo: 00/10499-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Lewis Joel Greene
• Beneficiário: Sandra Rodrigues Pereira Faça
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14247-6 - Center for Research on Cell-Based Therapy, AP.CEPID
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eletroforese Bi-Dimensional | Proteoma | Sangue De Cordao Umbilical | Sequenciamento De Proteina

Resumo

Célula dendrítica é uma das formas especializadas de células apresentadoras de antígenos, que desempenham um papel central na resposta imune, pois são essenciais na montagem de uma resposta eficiente das células T às peptídeos antigênicos. No presente projeto, propomos utilizar à análise proteômica para acompanhar a expressão de proteínas das células dendríticas durante o processo de diferenciação e maturação a partir de células CD34+ de sangue de cordão umbilical humano. As proteínas presentes no extrato das células ou organelas serão separadas por eletroforese bidimensional, comparadas pelo método de fluorescência diferencial (determinação das proteínas diferentes e/ou correspondentes nas amostras em diferentes estágios de desenvolvimento) e eletrotransferidas para membranas de PVDF. Os "spots" de expressão diferenciada serão caracterizados por seqüenciamento N-terminal, interno e/ou espectrometria de massa, para a identificação das proteínas em bancos de dados específicos. Propomos ainda, avaliar o efeito da intervenção com citocinas sobre o perfil de proteínas e sobre o rendimento de células obtidas deste processo de diferenciação. Nossos resultados poderão contribuir para o entendimento deste processo de diferenciação e ainda serem utilizados em estudos de terapia celular, que tem sido recentemente descritos. (AU)