Utilização de lipossomos como mediadores de infecção de picobirnavírus (PBV) em culturas celulares

• Processo: 99/00933-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 1999
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia
• Pesquisador responsável: Maria Silvia Viccari Gatti
• Beneficiário: Daniel Roberto Coradi de Freitas
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Lipossomos Macrófagos Proteínas virais Picobirnavirus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Lipofectin | Lipossomos | Macrofagos | Mecanismos De Restricao | Picobirna Virus | Proteinas Virais

Resumo

Os Picobirnavírus (PBV) foram identificados em eletroforese em gel de poliacrilamida por Pereira e col. quando estudavam rotavírus em fezes de crianças. São vírus pequenos, com dois segmentos de RNA fita dupla e, quando observados por microscopia eletrônica, apresentam de 30 a f, 40 nm de diâmetro sem estruturas definidas de superfície. Os PBV têm como hospedeiros aves e mamíferos tendo sido identificados nas fezes destes animais. Ainda não há um consenso sobre sua patogenia, mas estes vírus têm sido incluídos em trabalhos epidemiológicos, visando identificar agentes causadores de diarréia. Também não foi estabelecido um modelo de linhagem celular para replicação in vitro do PBV, sendo que a fonte para obtenção destes vírus tem sido as fezes de animais coletadas no campo ou de animais de laboratório, previamente inoculados com PBV. A necessidade de se obter replicação in vitro destes vírus se justifica, pois nas fezes ele se apresenta em baixas concentrações e sua purificação é dificultada pelo alto índice de contaminantes, o que toma extremamente difícil o seu estudo. A obtenção de altas concentrações do vírus possibilitaria o desenvolvimento de técnicas mais sensíveis e rápidas de diagnóstico do PBV como ELISA e RT-PCR, além de permitir a caracterização de suas proteínas virais. Os lipossomos catiônicos têm sido usados como mediadores de infecção viral em linhagens de células normalmente não permissivas, mostrando que os mecanismos de restrição das células estudadas aos vírus testados, se baseavam nos processos de adsorção e/ou penetração. Este projeto pretende utilizar células de cultura primária de intestino e macrófagos de ratos para infecção pelo PBV e utilizar lipossomos como mediadores para infecção do PBV nestas culturas e em células de linhagem. Também pretende-se inferir sobre os mecanismos de restrição ao PBV de linhagens de células não permissivas, utilizando sondas radioativas como [35S]metionina, H-aminoácidos e [3H]uridina. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

FREITAS, Daniel Roberto Coradi de. Detecção de Picobirnavirus por RT-PCR em fezes de ratos e suinos e por imunoperoxidase em intestinos de ratos. 0000. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.