Desenvolvimento de um sistema de expressão para uma metaloprotease fibrinolítica recombinante e estudo de suas atividades biológicas

• Processo: 97/01075-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 1997
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 1999
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo
• Beneficiário: Eduardo Luiz de Souza
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09300-7 - Expressão de metaloproteinases recombinantes de veneno de serpente com potencial de uso terapêutico, AP.JP
• Assunto(s): Fosfolipases Metaloproteinases Venenos de serpentes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Disintegrina | Expressao | Fosfolipase | Metaloproteinase | Venenos De Serpente

Resumo

Este projeto tem como objetivo o desenvolvimento de um sistema de expressão e purificação de uma metaloproteinase fibrinolítica recombinante a partir de um clone de cDNA já isolado e caracterizado, originário de uma biblioteca de cDNA construída a partir das glândulas veneníferas da serpente Agkistrodon contortrix laticinctus. Para expressão bacteriana serão utilizados os vetores pET e pMAL, buscando-se a expressão de uma proteína solúvel na tentativa de evitar as difíceis etapas de desnaturação e renaturação. A expressão na levedura Pichia pastoris também poderá ser utilizada. Uma vez obtida à proteína recombinante ativa, esta deverá ser caracterizada quimicamente. A produção de metaloproteinases recombinantes se justifica devido ao seu potencial de uso terapêutico, pois enzimas nativas isoladas dos venenos tem sido demonstradas como bastante efetivas no tratamento experimental de trombose. (AU)