Caracterização funcional do fragmento de 129 Pb (-186 a -58) da região promotora do gene de pufe de DNA BhC4-1, em linhagens transgênicas de Drosophila

• Processo: 02/06090-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nadia Monesi
• Beneficiário: Matheus Silveira Lecci
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 99/12787-6 - Análise funcional dos mecanismos reguladores da transcrição e amplificação em pufes de DNA, AP.JP
• Assunto(s): Drosophila Expressão gênica Eucariotos Puffs cromossômicos Sciaridae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Drosophilia Transgenicas | Expressao Genica | Gene Bhc4-1 | Promotores De Eucariotos | Pufes De Dna | Sciaridae

Resumo

O gene BhC4-1, do pufe de DNA C4 de B. hygida, é amplificado cerca de 21X e abundantemente transcrito na glândula salivar de larvas no final do desenvolvimento larval, como uma resposta tardia ao aumento dos níveis de ecdisona que í induzem a metamorfose. Ensaios realizados em Drosophila transgênicas revelaram que no sistema heterólogo a regulação tecidual e temporal de BhC4-1 é mantida, indicando conservação dos mecanismos controladores da expressão do gene. A região promotora de BhC4-1 foi caracterizada através da análise de um conjunto de linhagens transformadas com construções contendo deleções progressivas da região promotora, clonadas à montante do gene repórter lacZ e resultou na identificação de um fragmento de 129 pares de bases (- 186 a - 58, em relação ao início de transcrição), candidato a conter os elementos que promovem a expressão do gene na glândula salivar, de modo regulado no desenvolvimento. O objetivo deste projeto é testar em Drosophila transgênicas o fragmento de 129 pb quanto à sua capacidade de promover a expressão de BhC4-1 na glândula salivar de modo regulado no desenvolvimento, quando clonado à montante de um promotor basal heterólogo. Os resultados trarão novas informações sobre os mecanismos que regulam a expressão de genes de pufes de DNA e também poderão contribuir na elucidação dos mecanismos de resposta secundária ao pico hormonal que induz a metamorfose em insetos. (AU)