Expressão de moléculas 3F6-reativas e sua associação com infectividade e atividade sinalizadora em formas metacíclicas do Trypanosoma cruzi

• Processo: 02/00730-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nobuko Yoshida
• Beneficiário: Mauro Javier Cortez Véliz
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpo 3F6 | Formas Metaciclicas | Invasao Celular | Moleculas De Superficie | Sinal De Calcio | Trypanosoma Cruzi

Resumo

Uma série de estudos têm mostrado que a molécula de superfície gp82 de formas metacíclicas do T. cruzi, identificada pelo anticorpo monoclonal 3F6, tem um papel importante na invasão celular. Neste projeto estaremos analisando isolados de T. cruzi com pouca ou nenhuma expressão de gp82, mas que expressam um componente protéico de 30 kDa reconhecido pelo anticorpo 3F6. Utilizando como controle uma cepa de T. cruzi bem conhecida expressando a gp82, pretendemos: i) Determinar o nível de expressão de moléculas 3F6-reativas na superfície de formas metacíclicas dos diferentes isolados de T. cruzi; ii) Comparar a capacidade de invasão celular desses isolados; iii) Purificar a proteína de 30 kDa e a gp82 e comparar a capacidade de induzir sinal de Ca2+ na célula hospedeira; iv) Determinar se a proteína tirosina quinase do parasita é ativada nas formas metacíclicas dos diferentes solados, após interação com o anticorpo 3F6 e/ou extrato de células HeLa; v) Determinar a seqüência de aminoácidos da porção N-terminal da proteína purificada de 30 kDa; vii) Investigar se o tratamento de tripomastigotas metacíclicos com diferentes enzimas proteolíticas é capaz de torná-los 3F6-negativos e se esse tratamento modifica a capacidade invasiva dos parasitas. (AU)