Desenvolvimento de métodos de citometria de fluxo para o estudo de aspectos morfológicos e bioquímicos de células apoptóticas e necróticas

• Processo: 98/07338-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 1998
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: José Ernesto Belizario
• Beneficiário: Sylvia Claassen Enns
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Citometria de fluxo Apoptose Necrose Morte celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Citometria De Fluxo | Necrose

Resumo

A apoptose e a necrose são dois modos de morte celular envolvidos em um grande número de processos fisiológicos e patológicos. No estudo proposto vários métodos de biologia celular e substâncias fluorescentes serão utilizados para a padronização de um método de citometria de fluxo que permita a avaliação de aspectos morfológicos e bioquímicos de células em morte celular por apoptose e necrose. A meta principal do estudo será a padronização de um método que examine as correlações entre: 1) o conteúdo de DNA (marcação com iodeto de propídeo) e a presença de quebras na fita de DNA (incorporação in situ de nucleotídeos pela enzima terminal transferase e reconhecimento de nucleotídeo com anticorpos marcados com fluoresceina) e 2) o conteúdo de DNA (marcação com iodeto de propídeo) e a presença de um produto de degradação de um substrato protéico de enzimas caspases (Poli(ADP-ribore) polimerase ou pRB), reconhecidos através de métodos de imuno-detecção. (AU)