Caracterização funcional de mutantes da alfa-tropomiosina recombinante produzidas na levedura Pichia pastoris

• Processo: 99/00739-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 1999
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Celia Bertolini
• Beneficiário: Eduardo Hilário
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alfa-Tropomiosina | Pichia Pastoris | Producao Heterologa | Proteinas Mutantes

Resumo

O projeto a ser desenvolvido tem como objetivo principal a produção de formas mutantes da proteína alfa-tropomiosina na levedura Pichia pastoris. Para isto, o cDNA da alfa-tropomiosina de músculo cardíaco humano será subclonado em um vetor de expressão para Pichia pastoris e a proteína produzida. As mutações a serem introduzidas no cDNA da alfa-tropomiosina, correspondem a mutações gênicas encontradas em indivíduos portadores de anomalias cardíacas, associadas a proteínas constituintes do sarcômero. As formas mutantes serão construídas através da técnica de mutagênese sítio-dirigida e analisadas estruturalmente e funcionalmente. A análise estrutural será feita através de ensaios de dicroísmo circular e a análise funcional será feita através de ensaios de análise funcional característicos da proteína alfa-tropomiosina. (AU)