Extração e identificação das proteínas adesivas não específicas da superfície de Pseudomonas aeruginosa

• Processo: 00/10371-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: René Peter Schneider
• Beneficiário: Edna Kagohara
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09511-8 - Biopolímeros adesivos não-específicos de microrganismos, AP.JP
• Assunto(s): Pseudomonas aeruginosa Aderência bacteriana Biofilmes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adesao Bacteriana | Biofilme | Carimbos Celulares | Maldi-Tof | Pseudomonas Aeruginosa

Resumo

Os microorganismos iniciam a adesão a substratos inertes através da associação de biopolímeros adesivos não específicos que estabelecem ligações firmes entre o microorganismo e o substrato. O objetivo deste projeto é identificar as proteínas adesivas não específicas de Pseudomonas aeruginosa. Estas proteínas podem estar associadas com a superfície celular ou ancoradas dentro das membranas externas destes microorganismos Gram-negativos. Serão implementadas metodologias para a separação destas proteínas da superfície celular através de tratamentos brandos que não afetam a integridade da célula e para o isolamento das membranas externas e extração das proteínas contidas nestas membranas. As proteínas individuais nas amostras serão separadas por eletroforese bidimensional. As bandas obtidas nos géis serão extraídas e analisadas por espectrometria de massa MALDI-TOF, para determinação do peso molecular e do espectro de massa de cada proteína. Estes dados servirão de base para a comparação com espectros obtidos da análise de proteínas extraídas de "carimbos celulares". Os "carimbos celulares" são estruturas que permanecem nas superfícies após remoção dos organismos aderidos e que contém os polímeros adesivos não-específicos dos microorganismos. (AU)