Desenvolvimento de novos vetores de expressao para apresentacao de antigenos de pneumococo em bcg recombinante.

• Processo: 00/01746-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Luciana Cezar de Cerqueira Leite
• Beneficiário: Sheyla Grellet
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Desenvolvimento de vacinas BCG recombinante
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bcg Recombinante | Desenvolvimento De Vacinas | Pneumococo

Resumo

Devido ao fardo que infecções por S. pneumoniae impõem a saúde pública e ao fato de que ainda não existe uma vacina adequada contra esta bactéria, tornou-se importante investir no desenvolvimento de uma vacina eficaz e de baixo custo contra o pneumococo. Este projeto tem como objetivo a expressão de PsaA (pneumococcal surface adesin A), que tem se mostrado conservada, em BCG recombinante, usando pSiaF* como promotor em diversas construções: 1) plasmídeos replicativos extra-cromossomais com gene de resistência a kanamicina (os quais já dispomos), para testar a imunogenicidade da PsaA expressa em BCG; 2) Desenvolvimento de vetores de expressão em micobactéria sem marcador de resistência a antibiótico: i) constituição de um auxotrofo de leuD por recombinação homóloga, utilizando contra-seleção com SacB e construção de um vetor de expressão contendo o gene para complementação; e ii) utilização do gene do leuD como sítio de inserção de um cassete de expressão de PsaA por recombinação homóloga, utilizando a metodologia de sacB. Analise da resposta imune induzida por vacinas de SCG recombinante expressando a PsaA em camundongos. (AU)