Estudo da regulação da expressão do gene da carboxipeptidase M humana

• Processo: 01/05087-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: João Bosco Pesquero
• Beneficiário: Luciana Gilbert Pessoa
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Amplificação de genes Estrutura molecular Regulação da expressão gênica DNA complementar Carboxipeptidase M Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Regulacao | Sistema Calicreina Cinina

Resumo

Utilizando a técnica de amplificação das regiões terminais do cDNA (RACE), a estrutura molecular completa do gene da CPM incluindo as regiões 3'e 5' e o códon de iniciação ATG foram determinados. Também foi identificada a região promotora do gene utilizando-se análise computacional e encontrados os sítios TATA box e vários outros sítios de ligação de fatores de transcrição como CCAAT (Pessoa e cols., trabalho submetido). Além disto, utilizando RT-PCR também amplificamos e isolamos quatro diferentes transcritos para CPM, produzidos por "splicing" alternativo do mRNA maior Levando-se em consideração a modulação da expressão do sistema calicreína-cininas em processos patológicos, principalmente das cininases, torna-se importante o estudo da regulação da expressão da carboxipeptidase M. Nosso objetivo, portanto, é caracterizar a região 5' regulatória localizada imediatamente a montante do início da transcrição (região promotora) e os fatores de transcrição cis e trans envolvidos na regulação da expressão da enzima, incluindo os fatores responsáveis pela expressão alterada da enzima em tumores. (AU)