Caracterização do gene de Paracoccidioides brasiliensis homólogo a MDJ1, que codifica um DNA mitocondrial: regulação da expressão gênica

• Processo: 02/13905-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Rosana Puccia
• Beneficiário: Wagner Luiz Batista
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Paracoccidioides brasiliensis DNA mitocondrial
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Choque Termico | Hsp40 Mitocondrial | Paracoccidoides Brasiliensis | Pblon | Pbmdj1

Resumo

A diferenciação celular do P. brasiliensis de micélio para levedura nos pulmões é essencial para a ocorrência da paracoccidioidomicose e é dependente de temperatura. As proteínas de estresse (hsps) provavelmente exercem um papel relevante nesse processo. Em nosso laboratório foram clonados os genes de P. brasiliensis homólogos aos de duas proteínas mitocondriais de choque térmico, o PbLON (da proteinase Lon) e o PbMDJ1 (da chaperone Hsp40/Mdj1), que estão ligados por uma região 5' UTR comum. Essa organização é interessante, já que Mdj1p é essencial na digestão de proteínas desnaturadas pela Lon. O projeto de mestrado do candidato teve como objetivos a caracterização e expressão do PbMDJ1. Atualmente o gene está em fase final de seqüênciamento e análise. A região 5' foi expressa em bactéria e está sendo purificada para produção de anticorpos anti-Pb-Mdj. Verificou-se que o transcrito do PbMDJ1 (e não de PbLON) foi preferencialmente expresso na fase patogênica do fungo, a exemplo de outros transcritos do fungo analisados, homólogos aos de Hsps. O presente projeto amplia esses objetivos de forma a se concluir um doutoramento direto. Pretende-se analisar os elementos de transcrição regulatórios peculiares e comuns ao PbMDJ1/PbLON e verificar o fenótipo de P. brasiliensis desprovido desses genes funcionais. Os resultados do projeto poderão contribuir significativamente para o entendimento da regulação de proteínas envolvidas em choque térmico em P. brasiliensis. (AU)