Caracterização do fator de terminação de transcrição Rho em Caulobacter crescentus

• Processo: 02/00502-1
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de maio de 2002
• Vigência (Término): 30 de abril de 2006
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marilis Do Valle Marques
• Beneficiário: Valéria Cristina da Silva Italiani
• Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Bactérias Estresse oxidativo

Resumo

A terminação de transcrição possui duas funções regulatórias na expressão gênica em bactérias: manter cada unidade de transcrição separada da adjacente e permitir a expressão diferencial de muitos genes de um mesmo operon. A proteína Rho promove a terminação de transcrição de alguns genes, sendo assim um ponto alternativo de regulação da expressão gênica. Um trabalho anterior de nosso laboratório permitiu o isolamento de uma linhagem na qual o gene rho está interrompido pela inserção do transposon Tn5. Esta linhagem mostrou um fenótipo de alta sensibilidade a estresses, especialmente estresse oxidativo. Este projeto tem como objetivo a caracterização do gene rho de Caulobacter crescentus. Com esta finalidade, será realizado um estudo da auto-regulação de sua expressão, assim como será determinada a variação da proteína Rho durante o ciclo celular da bactéria. Um novo mutante nulo de rho será construído, e será utilizado para várias análises: a análise da meia vida do mRNA total, e do perfil da síntese de proteínas (determinado por eletroforese bi-dimensional), sendo que as proteínas que apresentarem variações serão identificadas por espectrometria de massa. Também será realizado um estudo do papel de Rho na expressão de genes envolvidos na resposta a estresse oxidativo. (AU)