Produção de anticorpos monoclonais anti-proteína P83 e sua aplicação ao estudo de P83 humana: propriedades da proteína, distribuição no sistema nervoso adulto e expressão durante a corticogenese cerebelar.

• Processo: 03/02370-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2003
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Antonio Roberto Martins
• Beneficiário: Thais Caroline Dallabona Dombroski
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteína p83 Corticogênese Anticorpos monoclonais Purificação de proteínas Interação proteína-proteína
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpo Monoclonal Anti-P83 | Corticogenese Cerebelar | Envelhecimento | Interacao Proteina-Proteina | Proteina P83 | Purificacao De Proteinas

Resumo

KM+ é uma lectina ligante de D(+)-manose, que foi purificada de semente de jaqueira (Artocarpus integrirona). Estudos realizados em nosso laboratório usando anticorpos policlonais mono-específicos anti-KM+, purificados por afinidade usando coluna de Sepharose-KM+, mostraram que o cerebelo e cérebro de rato em desenvolvimento exibem imunorreatividade KM+ símile desenvolvimento-dependente, com pico de expressão em P15. Esta proteína é solúvel, não exibe propriedades de lectina convencional, possui massa molecular aparente 83 kDa e foi por conseguinte denominada p83. p83 também foi detectada no córtex cerebral e cerebelo humanos por Western blot e está aparentemente associada a laminina, tau, tubulina e heat-shock protein 90b (HSP90b). Neste projeto propomos purificar p83 a partir de cérebro de rato em desenvolvimento, em escala preparativa (~500g de tecido); produzir anticorpos monocionais contra esta proteína, que reconheçam p83 de sistema nervoso humano e de cérebro e cerebelo de rato; utilizar os anticorpos monocionais para: estudar a expressão regional de p83 no encéfalo humano adulto e durante a corticogênese e o envelhecimento cerebelar humanos; estudar a co-localização de p83 com proteínas que interagem fisicamente com p83 no encéfalo humano. (AU)