Isolamento e análises de complexos protéicos intracelulares de Fibroblast Growth Factor-2 (FGF2) em células adrenocorticais Y1 de camundongo

• Processo: 04/00320-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2004
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Hugo Aguirre Armelin
• Beneficiário: Gilson Masahiro Murata
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/02717-8 - Desconstrução molecular do módulo de controle do ciclo celular em células adrenocorticais y1 de camundongo, AP.TEM
• Assunto(s): Fator 2 de crescimento de fibroblastos Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular Proteínas de fluorescência verde Proliferação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Camundongo | Fgf-2 | Trafico Intracelular

Resumo

Os objetivos deste projeto são: definir tráfico intracelular e interações proteína-proteína de FGF2 recombinante exógeno, tanto da espécie de 18kD como a de 22 kD, adicionadas externamente às células adrenocorticais de camundongo da linhagem Y1. Vamos produzir em bactéria quimeras recombinantes de FGF2 com, respectivamente, Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) e o domínio de Proteína A ligante de IgG (ProtA). Estas proteínas de fusão, isoladas e caracterizadas, serão utilizadas para tratar células Y1 para acompanhar o tráfico intracelular por mícroscopia confocal (FGF2-EGFP) e isolar complexos protéicos intracelulares por afinidade (FGF2-ProtA), para análise por SDS-PAGE, Western blot e espectroscopia de massa. Esta temática é de enorme interesse na pesquisa de fronteira da biologia celular atual devido à reconhecida importância das espécies de FGF2 (e outros membros da família FGF) no controle do desenvolvimento e diferenciação de órgãos e tecidos no embrião e, também, da proliferação celular normal e tumoral em múltiplos tecidos de organismos adultos. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MURATA, Gilson Masahiro. FGF2 de 18kDa e de 22,5kDa: sinalização molecular parácrina e funções biológias. 2010. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.