Estudos estruturais da proteina tirosina fosfatase n de ratos.

• Processo: 04/12198-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2005
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Igor Polikarpov
• Beneficiário: Huita Do Couto Matozo
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 99/03387-4 - Estudos estruturais de proteínas usando luz síncrotron, AP.TEM
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Estrutura Espalhamento de raios X a baixos ângulos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia De Raio X | Estrutura | Estudos Biofisicos | Proteinas Recombinantes | Saxs | Tirosina Fosfatase

Resumo

O projeto será desenvolvido nos estudos biofísicos e estrutural do domínio citosólico da proteína tirosina fosfatase eta (rPTPeta). O trabalho iniciará sub-clonando no vetor pET- 28a (+), o inserto que codifica a região C-terminalda proteína.Em seguida, bactérias E. Coli da linhagem BL 21 (DE3) serão transformadas em plasmídeos recombinantes contendo a seqüência de nucleotídeos do domínio intra ou extra celularda rPTPeta. As condições de expressão das proteínas recombinantes serão determinadas. Uma vez purificado o domínio intracelular da rPTPeta este será digerido com trombina e sua atividade enzimática de fosfatase testada. Com o intuito de se verificar o estado nativo da proteína, análise biofísica e estrutural através das técnicas de espalhamento dinâmico de luz, géis de gradiente nativo, dicroísmo circular, espectroscopia de fluorescência e espalhamento de raio-X a baixo ângulo (SAXS) serão realizados. As amostras purificadas também serão submetidas a diferentes condições de cristalização. Uma vez obtidos os cristais adequados, será utilizado a técnica de difração de raio-X para determinar a sua estrutura cristalográfica. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MATOZO, Huita Do Couto. Estudos estruturais do domínio catalítico da proteína tirosina fosfatase eta de rato. 2008. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Física de São Carlos (IFSC/BT) São Carlos.