Caracterização citoquimica de complexos DNA-proteina contendo variantes de histona H1

Autor(es)

José Ricardo Penteado Falco

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 1999-09-20

Membros da banca

Maria Luiza Silveira Mello; Mary Anne Heidi Dolder; Edson Rosa Pimentel; Flavio Henrique Caetano; Jose Chaud Netto

• Orientador: Maria Luiza Silveira Mello

Resumo

Valores de concentração crítica de eletrólitos (CEC) da cromatina de células (espermatozóides e eritrócitos de frango) conhecidas ou suspeitas de apresentarem variantes da histona HI foram comparados entre si com o objetivo de estabelecer semelhanças ou diferenças nos complexos DNA-proteína em nível citoquímico. A afinidade por moléculas de azul de toluidina em condições de competição com íons Mg2+ foi investigada nos espermatozóides do sapo boi, de ouriços do mar, de abelhas melíferas, de abelhas sem ferrão, de mamangavas e em eritrócitos de frango. Uma íntima relação entre os valores de CEC de Rana catesbeiana e de duas espécies de ouriço do mar com os da cromatina de eritrócitos de frango, que contém a histona H5, foi vista estar de acordo com certas semelhanças bioquímicas e estruturais entre seus complexos DNA-proteína. Quanto aos dados para abelhas, não se pôde associar a variabilidade em valores de CEC com a posição das espécies na respectiva árvore filogenética. Conclui-se, portanto, que a CEC de cromatina de espennatozóides que contêm histona H1 é um indicador útil da influência de variantes de H1 na organização de complexos DNA-proteína, mas é de pouco valor em estudos filogenéticos. Suspeitas cito químicas da presença de histonas H1 na cromatina de espermatozóides de Apis mellifera foram confirmadas através da extração, com PCA 5%, das proteínas básicas nucleares dos espennatozóides de Apis mellifera e eletroforese em gel de poliacrilamida 15% contendo 6,25M de uréia. As bandas detectadas, de pequena mobilidade eletroforética quando comparadas às H1 de timo de bezerro comercial (Sigma) e figado de rato, não foram encontradas em outros órgãos do mesmo animal aqui analisados, sugerindo a presença de histonas H1 com menor basicidade e/ou maior massa molecular relativa e exclusivas de espermatozóides em Apis mellifera (AU)

• Processo FAPESP: 95/02872-5 - Caracterizacao citoquimica de complexos dna-proteina contendo diferentes tipos de histonas h1.
• Beneficiário: Jose Ricardo Penteado Falco
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado