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Estudos de relação estrutura-função de proteinas da bacteria Xylella fastidiosa envolvidas em patogenicidade e adaptação

Texto completo
Autor(es):
Anita Paula Testa Salmazo
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
Imprenta: Campinas, SP.
Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
Data de defesa:
Membros da banca:
Francisco Javier Medrano; Luis Eduardo Soares Netto; Ione Salgado; Marcos Antonio de Oliveira
Orientador: Francisco Javier Medrano
Resumo

o sistema regulador de dois componentes responde a mudanças no meio ambiente, regulando genes envolvidos na adaptação de bactérias. Este sistema, normalmente é formado por duas proteínas, uma proteína sensora que nota a mudança ambiental, e outra proteína reguladora que regula os genes necessários para a resposta adequada. Assim, visando caracterizar as proteínas Xf0389 (reguladora) e Xf0390 (sensora) de Xy/ella fastidiosa, experimentos desde amplificação gênica até purificação protéica foram iniciados. Enquanto o gene Xf0390 foi amplificado e clonado em vetor pGEM-T-Easy, o gene Xf0389 foi inserido em vetor de clonagem e após a confirmação de similaridade do fragmento extraído do vetor com o gene descrito de X. fastidiosa, o fragmento foi subclonado em vetores de expressão (pET28a(+), pET29a(+) e pGEX4T-3). A proteína foi expressa em diferentes linhagens de Escherichia colí, para obtenção da mesma em sua forma solúvel. Através de experimentos de dicroísmo circular, a proteína foi caracterizada como estável e predominantemente rica em a-hélice. Esta última característica da estrutura secundária também foi mostrada pelo modelo construído para a proteína Xf0389, baseado na estrutura tridimensional da proteína "DNA binding response regulator D" (DrrD) de Thermotoga maritima que pertence a subfamília OmpR/PhoB (AU)

Processo FAPESP: 02/04994-6 - Estudos de relacao estrutura-funcao de proteinas da bacteria "xylella fastidiosa" envolvidas em patogenicidade e adaptacao.
Beneficiário:Anita Paula Testa Salmazo
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado