Estudos de relação estrutura-função de proteinas da bacteria Xylella fastidiosa envolvidas em patogenicidade e adaptação

Autor(es)

Anita Paula Testa Salmazo

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2004-07-27

Membros da banca

Francisco Javier Medrano; Luis Eduardo Soares Netto; Ione Salgado; Marcos Antonio de Oliveira

• Orientador: Francisco Javier Medrano

Resumo

o sistema regulador de dois componentes responde a mudanças no meio ambiente, regulando genes envolvidos na adaptação de bactérias. Este sistema, normalmente é formado por duas proteínas, uma proteína sensora que nota a mudança ambiental, e outra proteína reguladora que regula os genes necessários para a resposta adequada. Assim, visando caracterizar as proteínas Xf0389 (reguladora) e Xf0390 (sensora) de Xy/ella fastidiosa, experimentos desde amplificação gênica até purificação protéica foram iniciados. Enquanto o gene Xf0390 foi amplificado e clonado em vetor pGEM-T-Easy, o gene Xf0389 foi inserido em vetor de clonagem e após a confirmação de similaridade do fragmento extraído do vetor com o gene descrito de X. fastidiosa, o fragmento foi subclonado em vetores de expressão (pET28a(+), pET29a(+) e pGEX4T-3). A proteína foi expressa em diferentes linhagens de Escherichia colí, para obtenção da mesma em sua forma solúvel. Através de experimentos de dicroísmo circular, a proteína foi caracterizada como estável e predominantemente rica em a-hélice. Esta última característica da estrutura secundária também foi mostrada pelo modelo construído para a proteína Xf0389, baseado na estrutura tridimensional da proteína "DNA binding response regulator D" (DrrD) de Thermotoga maritima que pertence a subfamília OmpR/PhoB (AU)

• Processo FAPESP: 02/04994-6 - Estudos de relacao estrutura-funcao de proteinas da bacteria "xylella fastidiosa" envolvidas em patogenicidade e adaptacao.
• Beneficiário: Anita Paula Testa Salmazo
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado