Avaliação das interações microbianas e do papel das adesinas de superfície dos colonizadores iniciais Streptococcus oralis e Actinomyces oris na formação e estruturação dos biofilmes mistos com Candida albicans

Autor(es)

Indira Moraes Gomes Cavalcanti

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2016-03-29

Membros da banca

Altair Antoninha Del Bel Cury; Carlos Estrela; Marlise Inêz Klein; Livia Maria Andaló Tenuta; Antônio Pedro Ricomini Filho

• Orientador: Altair Antoninha Del Bel Cury

Resumo

A avaliação das interações microbianas é de suma importância para a compreensão do desenvolvimento de comunidades e seu controle. Na forma estruturada de biofilmes, bactérias estão aderidas às supefícies recobertas com película de saliva e continuam interagindo com as demais espécies no fenômeno de coadesão e coagregação. Essas interações ocorrem via moléculas denominadas adesinas, presentes na superfície dos micro-organismos. Dois importantes grupos de adesinas são o receptor de polissacarídeos RPS (do inglês Receptor of Polysaccharide) presente em S. oralis (So) e as fímbrias na superfície de Actinomyces oris (Ao), bactérias colonizadoras iniciais das superfícies orais. Ambas possuem papel essencial na adesão bacteriana à película de saliva, na interação com demais micro-organismos e na formação de biofilmes. O relacionamento desses micro-organismos e a base molecular das interações com o fungo C. albicans é motivo de estudo. Os objetivos deste estudo foram avaliar as interações microbianas entre S. oralis (So), A. oris (Ao) com C. albicans (Ca) e o papel de RPS e fímbrias tipo I e II nas comunidades mistas. Para isto, foram organizadas combinações duo e tri-espécies entre os micro-organismos em cepas silvestres: I (Ao + Ca), II (So + Ca) e III (So + Ao + Ca) e com cepas mutantes que não expressam RPS e fímbrias I/II: IV (Ao ?Fim + Ca), V (So ?RPS + Ca), VI (Ao ?Fim + So + Ca) e VII (Ao ?Fim + So ?RPS + Ca). Também foram desenvolvidos biofilmes mono-espécie de cada micro-organismo. Os micro-organismos cresceram em suspensão (planctonicamente) por 3 h em meio YPTG (YNB, peptona e triptona em tampão fosfato suplementado com glicose) e as interações presentes foram avaliadas por meio de microscopia de fluorescência. Os biofilmes foram desenvolvidos sobre discos de resina de polimetilmetacrilato (PMMA) e sobre lâminas de vidro, recobertas com película de saliva (2 h) e cresceram em mesmo meio até 24 h. A viabilidade celular foi determinada pela biomassa em biofilmes de 7 h e por Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL) em biofilmes de 1,5 e 24 h. O desenvolvimento e distribuição espacial dos micro-organismos foram avaliados pelas microscopias óptica, confocal a laser e de fluorescência. So e Ao interagem entre si na forma silvestre e diferentes formações de biofilmes foram observadas na presença de uma ou duas bactérias mutantes. Todas as bactérias interagem planctonicamente com Ca nas combinações e não competem por sítios de ligação na superfície do fungo. A presença de Ca em biofilmes duo-espécies influencia o aumento da comunidade bacteriana e a formação de biofilmes em cepa mutante de Ao, bem como as bactérias estimulam o crescimento de hifas. Há uma nova distribuição e predominância de células nos biofilmes tri-espécies contendo cepas mutantes. Com base nestes resultados, conclui-se que as bactérias colonizadoras iniciais So e Ao interagem entre si e com C. albicans na formas planctônicas e de biofilmes, porém as interações interespécies são independentes das adesinas RPS e fímbrias I/II (AU)

• Processo FAPESP: 13/15884-1 - Avaliação das interações microbianas e do papel das adesinas de superfície dos colonizadores iniciais Streptococcus oralis e Actinomyces naeslundii na formação e estruturação dos biofilmes de Candida albicans.
• Beneficiário: Indira Moraes Gomes Cavalcanti
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado