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Aplicação do método fluorescence lifetime imaging microscopy (FLIM) em exsudatos no pulmão

Texto completo
Autor(es):
Ana Paula Racanelli Bovo
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
Imprenta: Campinas, SP.
Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
Data de defesa:
Membros da banca:
Konradin Metze; Albina Messias de Almeida Milani Altemani; Ruy Gastaldoni Jaeger
Orientador: Konradin Metze
Resumo

Anatomia Patológica baseia-se predominantemente em métodos criados na segunda metade do século 19. A introdução de novas tecnologias poderia ser útil na elaboração dos diagnósticos. O método FLIM (Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy) é uma nova técnica de fluorescência em que o contraste se baseia no tempo de vida de fluoróforos individuais. Foram utilizados blocos de parafina do arquivo de autópsias e biópsias do Departamento de Anatomia Patológica da FCM-Unicamp. Selecionamos 53 casos de forma randômica de 1966 até 2014, que apresentaram exsudatos e transudatos eosinofílicos nas laminas histológicas do pulmão. Foram confeccionadas lâminas coradas fracamente com hematoxilina, posteriormente analisadas em microscópio óptico confocal utilizando o método FLIM. Para validar o método em lâminas histológicas, analisamos pequenas artérias presentes nas amostras pulmonares, onde observamos o tempo de vida FLIM nas diferentes estruturas ali presentes. Os valores do tempo de vida da fluorescência da hemácia, musculatura lisa e do colágeno variaram entre os casos, porém houve co-variação entre eles. Com ajuste de pseudocores relacionados a diferentes tempo de vida, obtemos imagens reprodutíveis. Na análise dos exsudatos eosinofílicos, houve uma diferença significativa entre a média dos tempos FLIM. A média do tempo de vida da proteinose alveolar foi significantemente maior do que a média dos outros exsudatos. O teste de aleatoriedade mostrou que a textura do edema e da proteinose alveolar foram significativamente diferentes das pneumonias e das membranas hialinas. A distribuição dos tempos de vida na membrana hialina pode ser mostrada por uma parábola. O estudo mostra que o método FLIM pode revelar valiosas informações complementares para a análise de amostras pulmonares (AU)

Processo FAPESP: 13/18468-9 - Diferenciação de exsudatos com novos métodos de microscopia de fluorescência
Beneficiário:Ana Paula Racanelli
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado