Desenvolvimento de métodos analíticos para a determinação de agrotóxicos em estipe de coqueiros (Cocos nucifera Linn.), água-de-coco e albúmen sólido por UHPLC-MS/MS e avaliação da translocação por endoterapia

Autor(es)

Jordana Alves Ferreira

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Química
• Data de defesa: 2016-11-10

Membros da banca

Carla Beatriz Grespan Bottoli; Ednei Gilberto Primel; Maria Olímpia Oliveira Rezende; Cassiana Carolina Montagner; Isabel Cristina Sales Fontes Jardim

• Orientador: Carla Beatriz Grespan Bottoli

Resumo

O coqueiro é a palmeira de maior importância nos ecossistemas tropical e subtropical, pois várias partes dele podem ser aproveitadas, garantindo assim a geração de empregos, renda e a alimentação, com a exploração de seu fruto na forma de água-de-coco, óleo e albúmen sólido. No entanto, a cultura do coqueiro está sujeita ao ataque de pragas e doenças que causam prejuízos à produção e afetam a qualidade dos frutos colhidos. A aplicação de agrotóxicos é ainda uma das práticas mais utilizadas para o controle de pragas e doenças. Portanto, a determinação de resíduos de agrotóxicos em água-de-coco e albúmen sólido é necessária para evitar riscos à saúde do consumidor. O principal objetivo deste projeto foi analisar os aspectos no movimento/translocação dos agrotóxicos no coqueiro, como ferramenta para auxiliar a aplicação dos agrotóxicos, e posterior avaliação na contaminação da água e do albúmen sólido do coco. Foi realizada uma avaliação qualitativa experimental para compreender os principais mecanismos de translocação acropetal por sistemas via raiz e tronco através da aplicação de traçadores (Rodamina B e azul brilhante FCF). Bem como, foi realizada a dissecação do coqueiro para compreender à sua anatomia e distribuição dos feixes vasculares. Desenvolveu-se e validou-se métodos para a determinação de 10 agrotóxicos em estipe de coqueiro (método A) e 9 agrotóxicos em albúmen sólido (método B) e 9 agrotóxicos para a água-de-coco (método C). Todos os métodos (A, B e C) para a determinação de agrotóxicos foram desenvolvidos e validados utilizando como técnica de extração QuEChERS (Quick Easy, Cheap, Effective, Rugged e Safe) acetato modificado e, como técnica de análise a cromatografia líquida de ultra alta eficiência acoplada à espectrometria de massas sequencial (UHPLC-MS/MS). O principal desafio no desenvolvimento dos métodos de extração foi a interferência do alto teor lipídico do albúmen sólido e água-de-coco no isolamento dos analitos de interesse. Esta interferência foi eliminada com o congelamento do extrato em gelo seco durante etapa de partição. A validação do método A foi assegurada com a obtenção de LOD (limite de detecção) e LOQ (limite de quantificação) variando de 0,012 e 0,040 mg kg-1, respectivamente. Já para o método B e C os valores de LOD e LOQ variaram entre 0,003 e 0,010 mg kg-1, respectivamente. Todos os analitos validados nos métodos apresentaram faixa linear dentro da faixa de concentração determinada (r²? 0,99). A exatidão dos métodos (A e B) mostrou que as medições estavam próximas do valor conhecido, sendo verificada a partir dos ensaios de recuperação em três níveis de concentração, obtendo-se resultados entre 50,0 e 120,0% para todos os compostos avaliados. A precisão para os métodos foi avaliada pela repetitividade dos ensaios e certificada com valores abaixo de 20%. A aplicabilidade destes métodos desenvolvidos e validados foi realizada com quatro Testes. No Teste 1 foram testadas as duas modalidades de aplicação endoterápica de agrotóxicos: infusão e injeção. Esses resultados iniciais de translocação foram promissores, sendo os agrotóxicos aplicados, detectados e quantificados no estipe em 15 cm acima do ponto de aplicação. Já no Teste 2 foram testados 6 diferentes tratamentos utilizando a endoterapia de injeção, sendo 5 destes com diferentes adjuvantes. Através de um delineamento inteiramente casualizado foram selecionadas 12 plantas, sendo coletadas amostras de estipe próximo aos pontos de aplicação e à copa do coqueiro, e frutos do cacho 17 (plena formação de água-de-coco) com 2 a 30 dias após as aplicações. A partir destes resultados, os agrotóxicos comerciais aplicados translocaram, e o Break-thru® foi selecionado como adjuvante. Adicionalmente, nos frutos não foi detectado nenhum agrotóxico. Após esses resultados, o projeto foi ampliado para 60 plantas divididas em dois tratamentos: (a) mix (7 agrotóxicos comerciais), e (b) ciproconazol. Estes tratamentos foram subdivididos em dois procedimentos: injeção e infusão em que foi utilizado o equipamento comercial Bite Infusion®. As amostras de estipe foram coletadas com 50 e 100 cm acima do ponto de aplicação com intervalos de 2 a 45 dias. Já para as amostras de frutos do cacho 19 e coco seco foram analisados a água-de-coco e o albúmen sólido, com intervalos de 45 a 120 dias após as aplicações. Os resultados mostraram que em ambas as técnicas endoterápicas (injeção e infusão) houve a translocação de todos os agrotóxicos no estipe. Já no fruto não foi detectado nenhum agrotóxico, demonstrando que o método endoterápico pode ser eficaz para o controle de doenças e pragas sem risco de contaminar o fruto. No procedimento utilizando apenas o ciproconazol, o método endoterápico de infusão mostrou que a translocação pode ser mais rápida, utilizando um volume menor de agrotóxico do que no método de injeção. Contudo, os equipamentos para esta finalidade precisam ser melhorados para tornar esta prática viável numa área produtiva. No Teste 4 foram monitoradas 36 amostras em triplicatas sendo, 18 de água-de-coco e 18 de albúmen sólido em 3 regiões brasileiras, como Campinas-SP, Goianésia-GO e Neópolis-SE, onde foram detectados carbofurano em todas as amostras de ambas as matrizes. Em algumas amostras de Neópolis foram detectados outros agrotóxicos como carbendazim, tiabendazol, ciproconazol e difenoconazol na água-de-coco e, para o albúmen sólido foram detectados ciproconazol, difenoconazol e espirodiclofeno. Portanto, em todas as amostras analisadas, os valores de concentração foram abaixo do limite de quantificação dos métodos (< 10 µg kg-1) e puderam ser apenas detectados, garantindo a qualidade dos frutos analisados (AU)

• Processo FAPESP: 12/18318-4 - Avaliação da contaminação de coqueiros (Cocos nucifera L.) devido à translocação acropetal de agrotóxicos, por cromatografia líquida de alta eficiência
• Beneficiário: Jordana Alves Ferreira
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado