Análises em dispositivos de papel: síntese de carbon dot aplicada à determinação de compostos de interesse clínico e paper-spray ionization para detecção direta de doping esportivo

Autor(es)

Eduardo Luiz Rossini

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Araraquara. 2020-03-02.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Química. Araraquara
• Data de defesa: 2020-02-14
• Orientador: Helena Redigolo Pezza

Resumo

A primeira parte deste trabalho foi desenvolvida no laboratório Fritz Feigl-UNESP/CAr, na qual foi descrito um novo carbon dot (CD) sintetizado a partir de ácido cítrico e tiramina usando uma rota em única etapa por meio de aquecimento por micro-ondas doméstico. O CD sintetizado apresenta emissão no azul quando irradiado com luz UV, que foi suprimida na presença de H2O2 e peroxidase. O CD foi utilizado para desenvolver metodologias para quantificar glicose em amostras biológicas utilizando plataforma de papel. O método desenvolvido foi aplicado em amostras de soro e urina certificadas, e não há diferenças estatisticamente significativas entre os resultados obtidos usando o dispositivo de papel com adição de padrão e as amostras certificadas. Também foram desenvolvidas metodologias utilizando 3D-µPAD com o reagente fluorescente e enzimas oxidase para quantificação de glicose e lactato em amostras de saliva. O preparo de amostra foi simples e rápido e o método foi validada utilizando adição de padrão e recuperação, além de ser aplicado em amostras de soro certificadas, não houve diferenças estatisticamente significativas entre os resultados obtidos e os valores de referência. A segunda parte deste trabalho foi desenvolvida no Badu’s research group na The Ohio State University durante o período sanduiche com bolsa da FAPESP, na qual foi desenvolvida a quantificação direta de agentes dopantes em amostras de urina sem tratamento da amostra por PS-MS. Paper-spray mass spectrometry é um método de ionização em condições ambientes que combina as vantagens das plataformas de papel com a confiabilidade das análises de espectrometria de massas, reduzindo o tempo de análise e o consumo de reagente e de solventes orgânicos. O uso de substâncias ilícitas para aumentar a desempenho de atletas em esportes é proibido e considerado doping. A superfície do papel foi tratada com triclorometilsilano utilizando reação em fase gasosa para aumentar a ionização dos compostos alvo. Essa abordagem foi aplicada para análise de dois agentes anabólicos (trembolona e clembuterol) e dois diuréticos (furosemida e hidroclorotiazida) em amostras de urina. Após a otimização das condições experimentais, os métodos desenvolvidos apresentaram repetibilidade satisfatória e boa correlação linear entre concentração e intensidade absoluta. Foram alcançados limites de detecção na faixa de sub-ng mL-1, abaixo dos níveis de desempenho mínimos requeridos pela WADA, utilizando o método de PS-MS com papel hidrofóbico sem nenhuma etapa de preparo ou clean-up da amostra. Os métodos propostos foram aplicados em amostras de urina fortificadas com os agentes dopantes e se mostraram rápidos, simples, sensíveis, exatos e precisos. (AU)

• Processo FAPESP: 16/20847-6 - Desenvolvimento de dispositivo analítico microfluídico em papel para análises de interesse clínico com detecção por fluorescência
• Beneficiário: Eduardo Luiz Rossini
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado