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Caracterização e expressão de dois genes codificando ATPases do tipo P em Blastocladiella emersonii

Texto completo
Autor(es):
Luciano Gomes Fietto
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Tese de Doutorado
Imprenta: São Paulo.
Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ)
Data de defesa:
Membros da banca:
Suely Lopes Gomes; Wilson Roberto Navega Lodi; José Franco da Silveira Filho; Mari Cleide Sogayar; Sergio Verjovski Almeida
Orientador: Suely Lopes Gomes
Resumo

A TPases do tipo P são proteínas integrais de membrana que usam a energia química contida na molécula de ATP para o transporte de cátions através de membranas. O nosso trabalho apresenta a clonagem e o sequenciamento de um gene (BePAT2) e a caracterização da expressão de dois genes (BePAT1 e BePAT2) codificando isoformas de uma ATPase do tipo P no fungo aquático Blastocladiella emersonii. As proteínas codificadas por estes genes, surpreendentemente se mostraram mais similares às Na+/K+ e H+/K+-ATPases de eucariotos superiores do que a outras ATPases de fungos. Experimentos de \"Northern blot\", imunoprecipitação e \"Western blot\" demonstraram que as ATPases (BePAT1 e BePAT2) são diferencialmente expressas durante o desenvolvimento de B. emersonii. Os resultados obtidos mostraram que o aumento da transcrição dos genes refletiu em um aumento da síntese e do acúmulo das ATPases, sugerindo um controle pré-traducional da expressão de BePAT1/2. Estudos de formação de fosfoenzima na presença de diferentes íons e inibidores, utilizando as enzimas imunopurificadas, sugerem que as proteínas codificadas por estes genes tenham uma atividade semelhante às Na+/K+-ATPases. Os nossos resultados de expressão e atividade mostram pela primeira vez, evidências da funcionalidade de genes codificando uma proteína similar às Na+/K+-ATPases em um eucarioto inferior. (AU)

Processo FAPESP: 97/13344-5 - Caracterização e expressão de dois genes codificando isoformas de ATPase tipo P em Blastocladiella emersonii
Beneficiário:Luciano Gomes Fietto
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado