Enterococcus faecalis: desenvolvimento de irrigante final para destruí-lo, análise de sua sobrevivência após tratamento endodôntico e sua capacidade de estimular citocinas próinflamatórias após estressado

Autor(es)

Rafaela Fernandes Zancan

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Bauru.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB)
• Data de defesa: 2020-11-05

Membros da banca

Marco Antonio Hungaro Duarte; Flaviana Bombarda de Andrade; Christian Giampietro Brandão; Mario Tanomaru Filho

• Orientador: Marco Antonio Hungaro Duarte

Resumo

Objetivo. O ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) é usado na terapia do canal radicular antes da obturação como um quelante de cálcio para remover a smear layer. O aumento das propriedades antibacterianas do EDTA pode reduzir as etapas da irrigação e, assim, reduzir o tempo de tratamento. Além disso, o uso de hipoclorito de sódio pode ser minimizado. Não há consenso claro quanto ao protocolo de irrigação ideal, baseado nas propriedades físico-químicas da dentina. Como os cimentos hidráulicos de silicato de cálcio (HCSC) são interativos com a dentina os efeitos da irrigação prévia podem influenciar a adesão do cimento e sua ação antimicrobiana. Metodologia: Artigo 1. EDTA 17% sem aditivos ou com cloreto de benzalcônio 1%, N-acetilcisteína 1% ou clorexidina 2% foram testados tendo solução salina como controle através de: propriedades antibacterianas para biofilme monoespécie de Enterococcus faecalis inoculado em dentina humana antes da exposição à solução irrigante ou depois (microscópio de varredura a laser confocal), capacidade de remoção da smear layer (microscópio eletrônico de varredura), molhabilidade da dentina pelo método da gota séssil (goniômetro), tensão superficial das soluções (teste da gota pendente) e viabilidade de células fibroblastos (redução do ensaio MTT); Artigo 2. Os danos irreversíveis à dentina produzidos por NaOCl (2 ou 5%), agentes quelantes (EDTA 17% ou EDTA 17% + cloreto de benzalcônio 1%) e solução salina isolados ou em uso sequencial foram avaliados considerando: microdureza da dentina, morfologia e conteúdo mineral (microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de energia dispersiva), matéria orgânica/inorgânica (espectroscopia infravermelha transformada Fourier), rugosidade superficial e módulo de Young (microscópio de força atômica). A caracterização de 4 cimentos (AH Plus, BioRoot, MTA Fillapex e Total Fill BC Sealer) e sua interação com a interface dentinária foram analisadas por duas técnicas (microscopia eletrônica de varredura/espectroscopia dispersiva de energia e microscópio de varredura a laser confocal); Artigo 3. HCSC (BioRoot, MTA Fillapex e Total Fill BC Sealer) e AH Plus foram expostos a dentina tratada com 2% NaOCl e 17% EDTA e sua ação antimicrobiana em relação ao E. faecalis dentro dos túbulos dentinários foi acessada através de microscópio de varredura a laser confocal. Resultados/Conclusão: Artigo 1. Os aditivos não alteraram a citotoxicidade do EDTA ou a capacidade de remoção da smear laye, mas aumentaram sua ação antibacteriana. A tensão superficial mais baixa e a melhor molhabilidade dos irrigantes foram obtidas pela adição do cloreto de benzalcônio ou N-acetilcisteína ao EDTA. A solução de EDTA-cloreto de benzalcônio (EDTA BC) foi melhor na prevenção da adesão de bactérias a dentina e no aumento de sua molhabilidade; Artigo 2. O NaoCl altamente concentrado seguido por EDTA mudou significativamente a dissolução de matéria inorgânica, microdureza e induziu uma topografia mais áspera na superfície da dentina com túbulos dentinários erodidos. Como a smear layer ainda estava presente nas superfícies dos grupos NaOCl+quelantes, o uso do EDTA-BC ou NaOCl na irrigação final é necessário para uma maior desinfecção. A irrigação adicional com NaOCl resultou na erosão da dentina ao redor dos túbulos e superfícies de smear layer. Com base nas análise do CLSM na dentina, os protocolos NaOCl/EDTA/NaOCl, ou NaOCl/EDTA-BC combinam com os cimentos AH Plus, Bio Root e Total Fill. A microdureza da dentina diminuiu progressivamente nos protocolos que continham NaOCl 5%, e foi recuperada após a aplicação do MTA Fillapex ou Total Fill BC Sealer; Artigo 3. A hidratação do cimento influenciou a atividade antimicrobiana dos HCSC uma vez que o BioRoot BCS, um cimento à base de água, forneceu a melhor atividade antimicrobiana sobre E. faecalis. A dentina tratada com EDTA não prejudica a ação antimicrobiana dos HCSC. Uma superfície sem smear-layer resultou em um maior número de bactérias mortas dentro de túbulos dentinários para todos os cimentos. (AU)

• Processo FAPESP: 16/25133-1 - Enterococcus faecalis: Desenvolvimento de irrigante final para destruí-lo, análise de sua sobrevivência após tratamento endodôntico e sua capacidade de estimular citocinas pró-inflamatórias após ser estressado.
• Beneficiário: Rafaela Fernandes Zancan
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado