Efeitos de diferentes regimes de irrigação nas propriedades físicoquímicas da dentina e consequências das alterações na adesão de microrganismos e do cimento endodôntico AH Plus

Autor(es)

Talita Tartari

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Bauru.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB)
• Data de defesa: 2017-11-28

Membros da banca

Clovis Monteiro Bramante; Luciano Bachmann; Renato Menezes da Silva; Rodrigo Ricci Vivan

• Orientador: Clovis Monteiro Bramante

Resumo

Além dos efeitos desejados, as soluções químicas utilizadas para auxiliar os instrumentos endodônticos na limpeza e desinfecção do sistema radiculares podem causar alterações nas propriedades físico-químicas da dentina e consequentemente afetar a adesão de cimentos endodônticos e microrganismos às paredes do canal radicular. Contudo, os efeitos de novos irrigantes e protocolos de irrigação ainda são desconhecidos. Os objetivos desta tese foram verificar as alterações nas propriedades de alguns irrigantes quando utilizados combinados em misturas, definir o tempo necessário para a remoção da camada de smear layer por um novo irrigante, determinar a capacidade de dissolução de matéria orgânica e os efeitos de algumas soluções e protocolos de irrigação nas propriedades físico-químicas de dentina e avaliar a adesão de microrganismos e cimento AH Plus à dentina após a submissão desta a diferentes sequências de irrigação. Em todos os experimentos com dentina as amostras utilizadas foram obtidas a partir de dentes bovinos. Nas análise realizadas nesta tese as seguintes soluções foram testadas isoladas e combinadas em diferentes protocolos de irrigação: solução salina (controle), hipoclorito de sódio (NaOCl), ácido etilenodiaminotetraacético trisódico (EDTAHNa3), ácido etilenodiaminotetracético tetrassódico alcalino (EDTANa4), clorexidina (CHX), ácido peracético (PAA) e ácido etidrônico (HEDP). O EDTAHNa3 e o EDTANa4 foram testados em relação aos seus efeitos sobre o teor de cloro livre do NaOCl. As soluções foram misturadas em uma proporção de 1:1 e a titulação iodométrica das misturas realizada em diferentes intervalos de tempo. O tempo necessário para a remoção da smear layer de amostras de dentina pela solução de EDTAHNa3 a 17% e diferentes concentrações de EDTANa4 isoladas e misturadas com NaOCl foi determinado com o auxílio do microscópio eletrônico de varredura (SEM). A capacidade de dissolução de matéria orgânica pelo NaOCl foi determinada pesando fragmentos de músculo bovino antes e depois da imersão em soluções de 1%, 2,5% e 5% de NaOCl em diferentes períodos de tempo. Além disso, os efeitos do EDTAHNa3, EDTANa4 e HEDP na dissolução de matéria orgânica pelo NaOCl foram avaliados. As alterações produzidas por todas as soluções isoladas e alguns protocolos de irrigação nos componentes orgânicos e inorgânicos da superfície da dentina foram analisadas pela técnica de reflexão total atenuada em espectroscopia no infravermelho por transformação de Fourier (ATRFTIR). Espectros de absorbância foram coletados da superfície da dentina antes e após a imersão das amostras nos irrigantes, e foram calculadas as razões das bandas de amida III/fosfato e carbonato/fosfato. Para quantificar a adesão da CHX à dentina mineralizada e à dentina desmineralizada por diferentes protocolos de irrigação, foram determinadas as áreas da banda associada a CHX com pico em 1492 cm1 em espectros obtidos por ATR-FTIR. Os efeitos de diferentes protocolos de irrigação na rugosidade e molhabilidade da superfície da dentina foram medidos com um rugosímetro de bancada e a técnica de gota séssil, respectivamente. Para os ensaios de adesão de microrganismos, amostras foram preparadas e tratadas da mesma maneira e com os mesmos protocolos de irrigação utilizados nos testes de rugosidade e molhabilidade. Em seguida, Candida albicans e Enterococcus faecalis foram mantidos em contato com a dentina por 2 horas e as amostras foram analisadas no microscópio confocal de varredura laser (CLSM). Testes de push-out foram realizados para determinar o impacto de diferentes protocolos de irrigação na resistência de união à dentina do cimento AH Plus ao longo do tempo. Canais de dentes incisivos de bovinos foram instrumentados, irrigados e em seguida obturados utilizando apenas o cimento AH Plus. Metade das amostras foi submetida a avaliação de push-out 7 dias após a obturação e a outra metade após 20 meses. Os resultados dos experimentos mostraram que o EDTAHNa3 causou uma perda quase completa e imediata do cloro livre do NaOCl, enquanto o EDTANa4 promoveu um declínio lento e concentração dependente. A smear layer foi removida apenas por soluções descalcificantes e em cerca de 1 min pelo EDTAHNa3 a 17% e em 5 min pelo EDTANa4, tanto isolados ou misturados com o NaOCl. O aumento da concentração de NaOCl e do tempo de contato com os fragmentos de músculo bovino intensificou a dissolução da matéria orgânica. As misturas de NaOCl com EDTANa4 e HEDP foram capazes de dissolver as amostras de músculo ao longo do tempo, no entanto, o EDTAHNa3 afetou fortemente a capacidade de dissolução do NaOCl quando eles foram misturados. Os resultados dos experimentos com ATR-FTIR mostraram que o aumento da concentração do NaOCl intensificou a desproteinização do colágeno da dentina com redução da relação amida III/fosfato. Para o mesmo agente de descalcificação, quanto maior a concentração e o tempo de imersão, maior a remoção de fosfato, exposição da matriz de colágeno e consequentemente o aumento da proporção amida III/fosfato. O PAA causou os maiores aumentos na relação amida III/fosfato, seguido de EDTAHNa3, EDTANa4 e HEDP e esta ordem foi mantida nos protocolos em que o NaOCl foi usado antes dos agentes descalcificantes. O NaOCl necessitou aproximadamente 0,5 min para desproteinizar a matriz de colágeno exposta após a remoção de fosfato pelo EDTAHNa3 e o PAA. A relação carbonato/fosfato diminuiu após 30 s de imersão das amostras em soluções de NaOCl a 1%, 2,5% e 5%, sem mais alterações ao longo do tempo. O carbonato da dentina foi removido mais rápido do que o fosfato por todos os agentes descalcificantes empregados sozinhos e nos protocolos de irrigação em que o uso do NaOCl foi seguido pelo uso do EDTAHNa3, PAA e HEDP. Para os protocolos de irrigação que associam o NaOCl com soluções quelantes, o último irrigante utilizado definiu as proporções finais de amida II/fosfato e carbonato/fosfato da dentina. Para as análises da adesão da CHX em ATR-FTIR, os resultados mostraram que a adsorção deste irrigante à dentina foi potencializada quando agentes quelantes foram utilizados antes da CHX. Em relação aos experimentos de rugosidade da superfície, a solução salina, o NaOCl, o HEDP e a CHX não alteraram a rugosidade da dentina, mas o EDTAHNa3 e o PAA a aumentaram. A molhabilidade da superfície aumentou após o uso de todos os irrigantes, sendo que o HEDP causou os maiores aumentos. Nos ensaios de adesão dos microrganismos, a smear layer e o colágeno exposto pelos agentes quelantes favoreceram a adesão de E. faecalis. A adesão da C. albicans foi maior em superfícies com smear layer ou mais mineral. O uso de CHX como irrigante final reduziu a adesão de ambos os microrganismos. A molhabilidade não influenciou a adesão dos microrganismos, enquanto o aumento da rugosidade parece potencializar a adesão do E. faecalis. Os experimentos de resistência de união do AH Plus à dentina mostraram que a irrigação com NaOCl e a mistura de NaOCl + EDTANa4 produziram valores de resistência de união em 7 dias mais baixos em comparação com NaOCl + EDTAHNa3, NaOCl + EDTAHNa3 + NaOCl, NaOCl + EDTAHNa3 + CHX e a mistura de NaOCl + HEDP. Após 20 meses, os valores mais baixos foram obtidos nos grupos irrigados com NaOCl e NaOCl + EDTAHNa3. Os grupos de NaOCl + EDTAHNa3 + NaOCl, mistura de NaOCl + HEDP e mistura de NaOCl + EDTANa4 apresentaram valores de força de união por push-out em 20 meses semelhante aos valores em 7 dias. Foi possível concluir que as soluções de irrigação testadas neste estudo têm diferentes efeitos na matéria orgânica e inorgânica e elas podem afetar as ações umas das outras quando misturadas. Independentemente de serem utilizadas isoladas ou combinadas em protocolos de irrigação, os irrigantes causam modificações nas propriedades físico-químicas dentinárias que influenciam na adesão do cimento AH Plus a curto e longo prazo e na adesão de microrganismos à superfície em casos de recontaminação. (AU)

• Processo FAPESP: 13/19789-3 - Efeitos de diferentes regimes de irrigação nas propriedades físico-químicas da dentina e consequências das alterações na adesão de microrganismos e do cimento endodôntico AH Plus
• Beneficiário: Talita Tartari
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado