Obtenção de anticorpos monoclonais humanos antitetânicos.

Autor(es)

Eduardo Aliprandini

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI)
• Data de defesa: 2015-08-12

Membros da banca

Ana Maria Moro; Silvia Beatriz Boscardin; Ana Paula Lepique; Daniela Santoro Rosa; Marco Antonio Stephano

• Orientador: Ana Maria Moro; Silvia Beatriz Boscardin

Resumo

Anticorpos monoclonais (AcMos) para uso terapêutico correspondem a uma área importante na indústria de biofármacos, em especial os AcMos humanos, que apresentam menor probabilidade de elicitar imunogenicidade. O objetivo deste trabalho consistiu em obter AcMos humanos antitetânicos através da separação de linfócitos B produtores de anticorpos específicos utilizando o antígeno ou de plasmablastos. As células foram coletadas de doadores após vacinação e separadas por equipamento de cell sorter. As regiões variáveis dos anticorpos foram amplificadas e clonadas em vetores de expressão, que foram usados para transfectar transitoriamente células HEK293-F. O uso da toxina tetânica conjugada independentemente com dois marcadores, biotina e Alexa Fluor® 647, possibilitou a separação específica de linfócitos B produtores de AcMos antitetânicos, que foram avaliados por ELISA, western blotting e pela inibição da ligação da toxina ao gangliosídio GT1b. O ensaio in vivo mostrou proteção total dos animais contra a toxina tetânica quando três AcMos foram usados em conjunto. (AU)

• Processo FAPESP: 11/22334-2 - Anticorpos Monoclonais Humanos Anti-Toxoide Tetânico
• Beneficiário: Eduardo Aliprandini
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado