Estudo dos mecanismos de perturbação da manutenção das paredes celulares fúngicas mediados por esteróis anormais.

Autor(es)

Leydi Roxana Gutiérrez Armijos

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI)
• Data de defesa: 2019-07-26

Membros da banca

Agustín Hernández López; Gabriel Padilla Maldonado; Carla Columbano de Oliveira; Anita Hilda Straus Takahashi

• Orientador: Agustín Hernández López

Resumo

Em plantas e fungos é conhecida a relação entre defeitos na homeostase dos esteróis e a fragilidade da parede celular. Por exemplo, em fungos, mutações nas últimas etapas da via de biossíntese do ergosterol ou tratamento com inibidores da biossíntese de esteróis (fungicidas SBI) resultam naquela fragilidade. O mecanismo para este fenômeno ainda é desconhecido, embora seja de interesse para entender os efeitos estáticos dos fungos destes importantes compostos médicos e agrícolas, bem também como o envolvimento dos lipídios na regulação dos processos biológicos. Anteriormente, nosso grupo reportou que os 8-desidroesteróis inibem a atividade da V-ATPase em vivo, com consequências negativas para a endocitose e localização anormal de Pma1p, uma proteína da membrana plasmática, no vacúolo. Isto levou-nos a pensar que a acumulação de esteróis anormais poderia estar afetando a biossíntese da parede celular através de uma interação inibitória lipídeo-proteína ou através da deslocalização das proteínas da membrana plasmática. As primeiras proteínas candidatas a considerar susceptíveis de encontrarem-se afetadas seriam, as responsáveis pela síntese de polímeros da parede celular, particularmente Fks1p (principal subunidade da Glucano Sintase (GS)), sendo que o glucano é o principal polímero da parede celular. As primeiras análises mostraram que os mutantes para o gene ERG2 apresentavam níveis reduzidos de glucano nas suas paredes celulares, concomitantemente com uma menor atividade de glucano sintase em extratos celulares. Particularmente, no mutante condicional erg2Gal derivado de selvagem crescido em meio de glucose (semelhante a uma célula fúngica tratada com fungicida), apresentou uma redução significativa na Vmax da glucano sintase que pode ser explicada por queda nos níveis de polipeptídeo medidos por Western blot. Entretanto, nenhuma alteração na atividade da via de sinalização CWI foi observada. Os dados sobre a localização de Fks1p no selvagem e nos mutantes para o gene ERG2 mostraram que está proteína encontra-se distribuída amplamente em membranas intracelulares junto com a membrana plasmática, porém diferindo em quantidade de Fks1p dependendo do mutante. No geral, nossos dados mostraram que provavelmente há uma retenção da principal subunidade Fks1p da GS em membranas associadas ao retículo endoplásmico e aparelho de Golgi, além disso também há uma redução de aproximadamente um terço na quantidade de Fks1p isso explicaria porque se observa uma fragilidade na parede celular nos mutantes para o gene ERG2. . (AU)

• Processo FAPESP: 16/07896-8 - Estudo dos mecanismos de perturbação da manutenção das paredes celulares fúngicas mediados por esteróis anormais
• Beneficiário: Leydi Roxana Gutiérrez Armijos
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado