Sinalização celular durante aumento de tensão no coração: implicações no desenvolvimento de hipertrofia cardiaca : estudos em corações isolados

Autor(es)

Priscila Perez Domingos

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
• Data de defesa: 2002-05-02

Membros da banca

Kleber Gomes Franchini; Leonardo Antonio Mamede Zornoff; Jose Butori Lopes de Faria

• Orientador: Kleber Gomes Franchini

Resumo

Fundamentação: O estímulo mecânico é o principal fator responsável pela indução de crescimento celular hipertrófico em miócitos cardíacos em condições de sobrecarga hemodinâmica. Dados experimentais disponíveis indicam que este efeito do estiramento mecânico se faz através da ativação de mecanismos que envolvem múltiplas vias de transdução e sinalização celular, que, por sua vez, regulam a expressão de um conjunto complexo de genes responsáveis pelas alterações fenotípicas dos miócitos cardíacos. Evidências mais recentes indicam que o estímulo mecânico é percebido e traduzido em sinais bioquímicos através de sítios especializados constituídos por proteínas transmembrana conhecidas como integrinas que conectam a matriz extracelular à rede do citoesqueleto. Em miócitos cardíacos, existem estruturas semelhantes, que conectam a linha Z do sarcômero à matriz extracelular através de integrinas. Esta estrutura estabelece ligação através da qual o estímulo mecânico pode ser transferido da matriz extracelular para as organelas, sarcômero e núcleo do miócito cardíaco. Além disso, várias moléculas de sinalização são imobilizadas e têm suas funções dependentes da ancoragem ao citoesqueleto, estabelecendo a base fisica para a transdução mecano-bioquímica. Dentre as várias moléculas de sinalização envolvidas na sinalização celular mediada pelas integrinas, a quinase de adesão focal tem sido das mais estudadas, porque evidências experimentais indicaram que esta enzima tem função central nos efeitos celulares resultantes da ativação de integrinas. A ativação da Fak por estímulos mecânicos foi demonstrada em miócitos cardíacos em cultura e em miocárdio de corações intactos de gatos e ratos. Em estudos anteriores demonstramos que o estímulo mecânico ativa precocemente a Fak, bem como um complexo de sinalização associado a esta enzima. A relação estreita entre a carga mecânica e a associação Fak/Src, Fak/PI-3 Kinase/ Grb2 e a ativação simultânea da Erk1l2 indicaram que este complexo pode contribuir para a resposta miocárdica à sobrecarga mecânica. Obietivo: Opresente estudo foi planejado para avaliar a influência do estímulo mecânico na ativação da Fak em corações isolados. Além disso, a ativação da Erk1l2, um efetor da Fak foi estudada com anticorpos fosfo-específicos para Erkl/2. A importância relativa da tensão passiva! estiramento e atividade contrátil na ativação da Fak e Erkl/2 pelo estímulo mecânico foi avaliada em corações paralizados com solução cardioplégica em corações perfundidos com diferentes concentrações de cálcio, respectivamente. Além disso, as localizações da Fak e Erk1l2 nos miócitos cardíacos foram confirmadas pela análise por imunohistoquúnica de cortes histológicos do miocárdio. Resultados: Aumentos na pressão diastólica de ~ Oaté 15 mrnHg aumentou rapidamente a fosforilação em tirosina da Fak (2,3 vezes), associação Fak/c-Src (2,8 vezes) e Fak/Grb2 (3,6 vezes). Estes resultados foram acompanhados por ativação da Erk1l2 (2,8 vezes) e aumentam a associação Fak/Erk1l2. Tanto a Fak como a Erk1l2 foram detectadas no sarcoplasma dos miócitos cardíacos, mas a Erk1l2 foi também encontrada nos núcleos de miócitos cardíacos. Estiramento do ventrículo esquerdo provocado por aumento da pressão da cavidade em corações perfundidos com solução cardioplégica provocaram ativação da Fak e Erk1l2 de maneira similar àquelas observadas em corações com batimento espontâneo. Contudo, aumentos na atividade contrátil induzida por cálcio não foram acompanhados de ativação da Fak ou Erkl/2 no miocárdio. De maneira geral, estes achados demonstraram que o estiramento mecânico e não a atividade contrátil é responsável pela ativação da Fak e da Erk1l2 durante sobrecargas mecânicas. Conclusões: Nossos resultados acrescentaram informação sobre a ativação da Fak pelo estímulo mecânico. A demonstração de que o estiramento ou tensão passiva e não aumentos na atividade contrátil ativaram a Fak e seu efetor Erk1l2 é compatível com a hipótese de que a ativação da Fak pelo estímulo mecânico pode estar ligada à ativação do complexo integrina/citoesqueleto (AU)

• Processo FAPESP: 99/06935-2 - Sinalização celular durante aumento de tensão no coração: implicações no desenvolvimento de hipertrofia cardíaca: estudos em coração isolado
• Beneficiário: Priscila Perez Domingos
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado