Caracterizacao e identificacao dos fatores ligantes a regiao -70/-33 do promotor do citocromo p450c17 humano e avaliacao do papel do sf-1 na transcricao do cyp17 mediada por camp.

Resumo

O citocromo P450c17, codificado pelo gene CYP17, é o principal regulador qualitativo da biossíntese dos hormônios esteróides. A análise do promotor proximal do CYP17 humano levou à detecção de três sítios de reconhecimento para o fator de esteroidogênese 1 (SF-1), dois sítios (FP1 e FP2) que interagem com fatores da família NF-1 e um sítio (FP3) de interação com os fatores Sp1 e Sp3. Na posição -70/-33 há, possivelmente, um quarto sítio SF-1 adjacente a uma suposta seqüência de reconhecimento de fatores GATA. Neste projeto, analisaremos em maior profundidade o papel do SF-1 na regulação da transcrição do CYP17 humano. Para isso pretendemos caracterizar e identificar os fatores ligantes da seqüência -70/-33 e estudar também o papel do SF-1 na transcrição do CYP17 mediada por cAMP. Serão utilizadas técnicas de análise de interação DNA/proteína (EMSA, footprinting com radical hidroxila e ensaio de interferência da metilação) e mensuração da atividade de construções promotor/repórter transfectadas em células tratadas ou não com cAMP. (AU)