Defeitos na formação do órgão dental

Resumo

Defeitos na formação do órgão dental estão entre as alterações mais comuns em humanos. Apesar de não compreenderem um problema de saúde pública estas alterações podem causar problemas estéticos, além de comprometerem a fala e mastigação. Entre os defeitos mais comuns na formação da dentição estão a agenesia dental e defeitos na formação do esmalte. A importância de diversos genes na formação do dente tem sido evidenciada por experimentos usando camundongos "knockout" e por mutações em humanos. Mutações no gene PAX9 em famílias humanas causa oligodontia (ausência de mais de 6 dentes) que afeta principalmente todos os dentes molares e segundo pré-molares. No entanto, a gênse da hipodontia (ausência de 1 a 6 dentes) ainda foi claramente estabelecida. Em estudo desenvolvido em nosso laboratório com o auxílio da FAPESP (proc. 01/08972-4) descobrimos recentemente que dois polimorfismos presentes na região promotora do gene PAX9 parecem estar associados a agenesia dental em humanos (p~0,01, resultados ainda não publicados). Estes resultados nos motivaram a focalizar e ampliar nossa análise na região 5' do gene PAX9 objetivando: (1) analisar a possível associação de outros dois polimorfismos presentes na região promotora deste gene com a agenesia dental em humanos; (2) estudar a influência dos polimorfismos associados à agenesia dental na atividade transcricional por ensaios de mobilidade em gel de poliacrilamida (gel shift) e uso de um "repórter gene" associado a região promotora; (3) análise comparativa dos sítios polimórficos entre primatas do velho mundo (i.e. africanos, que possuem dentição semelhante aos humanos) e brasileiros (que possuem 3 dentes pré-molares em cada hemi-arcada), (4) análise do padrão de metilação de regiões ricas em CpG da região promotora do gene PAX9; (5) estudar a influência da vitamina A e dexametasona na atividade da região promotora do gene PAX9. Análises preliminares feitas em nosso laboratório mostram que a matriz do esmalte em incisivos de ratos é birrefrigente quando analisada em microscopia de luz polarizada. Este fato, apesar de ainda não ser relatado na literatura, é em nossa opinião de grande importância, pois mostra que a matriz orgânica do esmalte dental possui uma organização supramolecular, que pode ser facilmente estudada pela microscopia de luz polarizada. Esta descoberta abre novas perspectivas no estudo da formação do esmalte dental, pois permite estudar o efeito de fatores genéticos e ambientais sobre a organização supramolecular da matriz do esmalte dental e correlacionar com efeitos na estrutura do esmalte maduro. O presente estudo tem os seguintes objetivos específicos. (1) Estudar a birrefringência da matriz do esmalte em dentes incisivos normais nas diversas fases da odontogênese. (2) Investigar o possível efeito do flúor na organização supramolecular da matriz de esmalte vista ao microscópio de luz polarizada, na tentativa de esclarecer, pelo menos em parte, o mecanismo de desenvolvimento da fluorose dental. (4) Em colaboração com o Dr. John D. Barlett da Harvard Medical School e Ashok Kullarni NIH-USA, vamos estudar a birrefringência da matriz do esmalte dental em camundongos "knockout" para os genes da MMP-20 e amelogenina. (5) Estudar o efeito de inibidores de serina proteinases e metaloproteinases "in vitro" na birrefringência da matriz do esmalte. (AU)