Estudos bioquimicos e estruturais de inibidores de serinoproteases purificados de ovos do inseto triatoma infestans.

Resumo

Os inibidores de serinoproteases representam uma classe de moléculas produzidas por hematófagos que merecem destaque, visto a necessidade do controle de inúmeras serinoproteases presentes nos invertebrados. Em animais hematófagos invertebrados alguns inibidores com função conhecida já foram descritos, tais como os anticoagulantes: hirudina, TAP (Tick Anticoagulant Peptide), ornitodorina, dipetalogastina, infestina 1-2, infestina 3-4, dentre outros. No entanto, muitos outros inibidores de serinoproteases presentes em animais invertebrados não apresentam papel fisiológico conhecido como: FPI-F (inibidor de protease de fungo de B. mori), LMCI-1 (inibidor de quimotripsina de Locusta migratoria), SGPI-1 (inibidor de protease de Schistocerca gregaria), RsTIs (inibidores de tripsina de carrapato R. sanguineus), BmTIs (inibidores de tripsina de carrapato Boophilus microplus), infestina 1R (inibidor de elastase de T. infestans). Recentemente, o nosso grupo purificou e caracterizou dois inibidores de proteases presentes em ovos de T infestans que apresentaram a mesma seqüência de aminoácidos em sua região N-terminal. Estes resultados permitiram classificar estes inibidores como membros da família Pacifastina, sendo os primeiros membros ao nível de proteína a serem descritos em animais hematófagos. Inibidores de proteases de T. infestans tem sido objeto de investigação em nosso grupo há alguns anos e no presente projeto temos como objetivo geral estudar os inibidores de proteases presentes em ovos de T. infestans. Para tal, pretendemos: 1. Clonar o gene que codifica o inibidor. 2. Determinar em quais tecidos este inibidor é expresso e quantificar a sua expressão gênica por PCR em tempo real. 3. Avaliar o papel deste inibidor na cascata da pro-fenoloxidase e seu potencial como antimicrobiano.