Estudos da função fisiológica e potencial biotecnológico de inibidores de proteases e anti-hemostáticos presentes em artrópodes hematófagos

Resumo

A diversidade de atividades biológicas presentes em artrópodes hematófagos, somada à importância destes como vetores de doenças, tem motivado o grupo a investigar a presença de novas moléculas anti-hemostáticas e inibidores de proteases, em três espécies de artrópodes com grande relevância no Brasil como transmissores de doenças em populações humanas e de animais de criação, sendo eles: o barbeiro Triatoma infestans, o carrapato bovino Boophilus microplus e o mosquito Aedes aegypti. Nos três casos, o uso indiscriminado de pesticidas para o controle destes vetores tem contaminado o meio-ambiente, a população humana e ao longo do tempo tem levado ao problema da resistência aos produtos químicos utilizados. A Organização Mundial de Saúde aponta como uma das causas do insucesso no combate às doenças transmitidas por estes ectoparasitas o desconhecimento da biologia destes animais. Portanto, maior compreensão dos diversos mecanismos que permitem tamanho sucesso adaptativo à hematofagia poderá revelar novos alvos para o desenvolvimento de estratégias de controle destes animais, através do desenvolvimento de vacinas ou de novas drogas. Ao longo dos últimos 8 anos o nosso grupo vem contribuindo para um melhor entendimento da bioquímica de alguns artrópodes hematófagos dentre eles o barbeiro T. infestans, que controla a coagulação sanguínea do seu hospedeiro utilizando inibidores de trombina e fator XIIa, e interessantemente produz estas proteínas na forma de uma única molécula precursora. Estudos utilizando o inibidor de fator XIIa permitiram a submissão de um processo de patente de anticoagulantes. Os nossos resultados recentes também mostram que inúmeros inibidores de serinoproteases de carrapato B. microplus e a mosca H. irritans podem apresentar diversas funções tais como controladores de enzimas endógenas e ou de microorganismos. No presente projeto temos como metas aprofundarmos os estudos de caracterização funcional e estrutural de diversas moléculas identificadas pelo grupo, lançando mão de ferramentas como: RNAi, PCR tempo real (RT-PCR), proteoma, testes antifúngicos, inibição de proteases de microorganismos, testes de coagulação de hemolinfa e ativação da cascata da fenoloxidase. Com estes esforços pretendemos contribuir no entendimento do papel destas moléculas na fisiologia destes hematófagos, assim como utilizar essas moléculas: para o estudo de interação proteína-proteína destes ectoparasitas, para desenvolvimento de vacinas e com potencial biotecnológico para utilização em medicinas humanas, veterinárias e agricultura. (AU)