Abordagens para identificação de variantes de splicing associadas ao câncer de mama sob influência da alta expressão do oncogene ERBB2

Resumo

Atualmente acredita-se que mais de 75% de todos os genes humanos sofrem splicing alternativo, sugerindo que este fenômeno, juntamente com outras modificações pós-transcricionais, contribui para a complexidade proteômica. Mudanças na produção de isoformas de diversos genes vêm sendo observadas em diferentes tumores. Diversos trabalhos sugerem que células neoplásicas podem apresentar um padrão de splicing alternativo especifico, resultando na produção de transcritos que raramente estariam presentes na célula sadia. Além disso, um estudo in silico recente identificou uma superexpressão de fatores reguladores de splicing em células tumorais em relação a células normais. No entanto, ainda não está claro se essas observações são eventos independentes, ou se há alguma correlação entre elas. O presente projeto pretende validar experimentalmente, por RT_PCR em Tempo Real, o nível de expressão de fatores de splicing, que através de análises bioinformáticas de MPSS estão superexpressos em linhagens de mama tumoral em relação à mama normal. Além disso, este projeto também têm por objetivo verificar a influência desta expressão diferencial na produção de diferentes isoformas de genes associados a tumor de mama. (AU)