Identificação de elementos estruturais no tRNASecUCA determinantes da ligação com proteínas

Resumo

O aminoácido selenocisteína representa a principal forma biológica de selênio e sua síntese de selenocisteína, juntamente com sua incorporação co-traducional em selenoproteínas requerem uma complexa maquinaria enzimática e de sinalização. A selenocisteína, juntamente com a pirrolisina, resulta na expansão do código genético dos tradicionais 20 aminoácidos para atualmente um total de 22 aminoácidos. O estudo da via metabólica da selenocisteína e das enzimas envolvidas nessa via é o centro de interesse em nosso grupo. Essa via tem despertado interesse pela sua particular conseqüência evolutiva e potencial uso prático. Este projeto visa a aplicação da metodologia de seleção in vitro no tRNAsec de células procarióticas de Escherichia coli e a avaliação das diversas randomizações geradas na interação e afinidades com a proteína Selenocisteína Sintase (SELA) do mesmo organismo. Essas análises serão realizadas pelo sistema BIAcore e por microcalorímetro para proporcionar medidas quantitativas da constante de dissociação entre os elementos SELA-tRNAsec e comparações dessa interação entre tRNAsec nativo e os RNAs que sofreram o processo de randomização. (AU)