Avaliação da relação entre aprendizagem e memória, neurogênese e envelhecimento, em animais epilépticos crônicos utilizando o modelo da pilocarpina

Resumo

O hipocampo é uma estrutura límbica, localizada no lobo temporal, que está diretamente relacionada aos processos fisiológicos de aprendizagem e memória, além de diversos processos patológicos subjacentes à epilepsia do lobo temporal. Dentre as diversas alterações plásticas que ocorrem no hipocampo tanto nos processos de aprendizagem como em conseqüência das crises epilépticas induzidas, ressalta-se o aumento da neurogênese das células granulares. Por outro lado, o envelhecimento e as crises epilépticas espontâneas se correlacionam a déficits cognitivos e reduções na taxa de neurogênese dessas células. Esse estudo visa comparar a capacidade de aprendizagem e retenção desse aprendizado entre animais idosos epilépticos crônicos e animais controle e a relação de possíveis déficits cognitivos com a taxa de neurogênese no giro denteado do hipocampo. Para realizar esses experimentos serão utilizados ratos Wistar machos (200-250g) que serão submetidos à indução da epilepsia do lobo temporal (status epilepticus, SE) através da injeção intraperitoneal de cloridrato de pilocarpina (Merck, 320 mg/Kg). Os animais serão submetidos ao labirinto aquático de Morris em 2 períodos diferentes de suas vidas epilépticas: 2-3 meses ou 8-15 meses após a indução do SE. Dois dias antes do início dos testes no labirinto, os animais receberão 4 doses de Bromodeoxiuridina (BrdU, 50mg/kg) para marcação de células em divisão. Haverá dois grupos controle: (1) animais que receberão injeção de salina ao invés de pilocarpina e (2) animais que receberão pilocarpina, mas ao não desenvolver SE, não apresentará crises epilépticas espontâneas. Os resultados consistirão da análise dos dados comportamentais e da comparação do número de células BrdU-positivas no giro denteado do hipocampo dos animais dos diversos grupos experimentais. O fenótipo dessas células será avaliado pela co-localização de BrdU e GFAP (marcador de astrócitos) ou Double-cortin (DCX, marcador de neurônios imaturos) ou Neu-N (marcador de neurônios maduros). Dessa forma, esse estudo pretende investigar a relação entre a alteração da cognição e da taxa de neurogênese levando-se em conta o envelhecimento cerebral e as alterações provocadas pela epilepsia crônica induzida por pilocarpina. (AU)