Estudos de renaturação em alta pressão hidrostática de proteínas agregadas em corpos de inclusão citoplasmáticos produzidos em Escherichia coli

Resumo

A recuperação de proteínas nativas a partir de agregados em corpos de inclusão citoplasmáticos em E. coli é um obstáculo na produção de proteínas recombinantes, tanto para finalidade de pesquisa quanto para a produção industrial. Os processos tradicionais de desnaturação das proteínas nos agregados utilizando-se altas concentrações de agentes caotrópicos seguido de renaturação geralmente levam a baixos rendimentos de proteínas nativas, pois as porcentagens de reagregação frequentemente são altas. Altas pressões hidrostáticas agem sobre soluções proteicas desfavorecendo interações hidrofóbicas e eletrostáticas que causam a agregação de proteínas. A solubilização e a renaturação de proteínas recombinantes agregadas em corpos de inclusão citoplasmáticos produzidos em E. coli podem ser realizadas em uma só etapa em condição de pressões da ordem de 100 a 300MPa. Deveremos estabelecer e otimizar processos de renaturaçao em altas pressões hidroestáticas de diferentes proteínas expressas como agregados em corpos de inclusão em Escherichia coli. (AU)