Vitrificacao de embrioes bovinos produzidos in vitro apos suplementacao do meio de cultivo embrionario com phenazine ethosulfate e soro fetal bovino no periodo de pos compactacao...

Resumo

Os embriões advindos de sistemas de produção in vitro (PIV) são mais sensíveis a criopreservação do que embriões produzidos in vivo, resultando em taxas de concepção menores após a inovulação, e tal fato parece estar relacionado com o maior conteúdo lipídico encontrado nos embriões PIV. Este experimento tem como objetivo estudar o sucesso da criopreservação de embriões bovinos PIV, após terem sido manipulados metabolicamente, através da adição de phenazine ethosulfate. Oócitos obtidos de ovários de abatedouro serão maturados por 22 a 24 h em atmosfera de 5% CO2 em ar a 38,5ºC em TCM 199. Decorridas as 18 h de FIV em meio Fert-Talp, os possíveis zigotos serão cultivados por 60 h (2,5 dias) no meio base de cultivo (Nutricell, Campinas), em atmosfera com 5% de CO2, 5% de O2 e 90% N2 a 38,5ºC. Após esse período os embriões serão divididos em grupos distintos: Grupo 1: Meio base de cultivo; Grupo 2: Meio base de cultivo, acrescido de 0,3 uM de phebazine ethosulfate; Grupo 3: Meio base de cultivo, acrescido de 10% SFB; e Grupo 4: Meio base de cultivo, acrescido de 10% SFB e 0,3 uM de phebazine ethosulfate. Os embriões permanecerão em cultivo até o 7º dia após a fertilização, quando serão analisados de acordo com sua qualidade. Metade dos embriões de cada grupo serão submetidos à vitrificação, e o restante dos embriões serão avaliados quanto ao conteúdo lipídico citoplasmático ou grau de ocorrência de apoptose. (AU)