Caracterização molecular de micobactérias de crescimento rápido associadas ou não a surtos em cirurgias laparoscópicas para elaboração de teste de identificação rápida

Resumo

Surtos de infecções causadas por micobactérias não tuberculosas de crescimento rápido em cirurgias por via laparoscópica vêm ocorrendo desde 2004 em diferentes Estados (Pará, Goias, Rio de Janeiro, Espírito Santo, Rio Grande do Sul e Paraná). Pela técnica de identificação molecular denominada PCR-Restriction Enzyme Analysis (PRA-hsp65), os isolados dos diferentes Estados apresentaram um perfil comum a três espécies de micobactérias - Mycobacterium abscessus, Mycobacterium massiliense e Mycobacterium bolletii. A cepa responsável pelos surtos foi posteriormente identificada por sequenciamento de DNA como M. massiliense. Análises preliminares realizadas até o momento com isolados do Pará, Rio de Janeiro, Goias e Espírito Santo, usando a técnica de tipagem molecular Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), mostraram que os pacientes foram infectados por uma única cepa de M. massiliense. Esta cepa só pode ser identificada no momento por sequenciamento de DNA e PFGE, ambos métodos caros e não amplamente disponíveis. Neste projeto serão estudadas 58 cepas isoladas do surto do Espírito Santo e 53 cepas apresentando o mesmo perfil de PRA-hsp65, mas não relacionadas a estes surtos, isoladas no mesmo período, em diferentes regiões do país. Será avaliada a diversidade genética desta(s) cepa(s) por sequenciamento de regiões conservadas do genoma de micobactérias. Pretendemos desenvolver um teste molecular rápido de identificação de cepas relacionadas a estes surtos, diferenciando-as das não relacionadas ao surto. Para isso, as sequências de DNA obtidas serão comparadas na busca de assinaturas genéticas que possibilitem a diferenciação entre isolados do surto e não relacionados. Como resultado, o teste molecular desenvolvido poderá ser implementado nos Lacens dos diferentes Estados para detecção de novos casos e vigilância epidemiológica. (AU)