Avaliacao dos precursores da apoptose neuronal em preparados citosolicos, mitocondriais e nucleares do cortex cerebral frontal e hipocampo de porcos submetidos a hemodiluicao normovolemica aguda: e..

Resumo

Este estudo visa comparar durante a hemodiluição normovolêmica aguda (HNA), em dois distintos valores de hematócrito (Ht) 15 e 10%, a presença de precursores da morte celular programada (apoptose), em frações subcelulares do córtex frontal e do hipocampo cerebrais. Serão utilizados 32 porcos (peso 30-35 kg) randomizados em 4 grupos: Grupo I (Ht 15%), n=8, submetidos a HNA com amido hidroxietílico 6% (130/0,4) até hematócrito alvo de 15%; Grupo II (Ht 10%), n=8, submetidos a HNA com amido hidroxietílico 6% (130/0,4) até hematócrito alvo de 10%; Grupo III (Controle), n=8, somente anestesiados e instrumentados; Grupo IV (hipóxia hipóxica), n=8, submetidos a ventilação com mistura hipóxica de 02 e N2, com FiO2 de 6%, para se obter o controle positivo dos precursores da apoptose. Serão realizadas avaliações hemodinâmicas e de oxigenação nos seguintes momentos: T0 (30 minutos após estabilização da anestesia e instrumentação), T1 (ao final da hemodiluição), T2 (60 minutos após a hemodiluição), T3 (90 minutos após a hemodiluição). Ao final do procedimento, serão coletados fragmentos de córtex frontal e hipocampo para avaliação dos precursores de apoptose neuronal nestas regiões do cérebro. Serão estudadas as proteínas pró-apoptóticas BAX e anti-apoptótica Bcl-2 através da técnica de Western blot, em preparados nucleares e mitocondriais, e a atividade das caspases 3 e 9 citosólicas e mitocondriais determinada por espectrofluorometria. Finalmente, a fragmentação do DNA nuclear e mitocondrial serão avaliadas. (AU)